Эстель смывка кислотная: Эмульсия для удаления стойких красок с волос Estel Color Off — «УДАЧНЫЙ ОПЫТ 4 СМЫВОК с подробными фото ДО и ПОСЛЕ+ ЧЕМ ЗАМЕНИТЬ ШАМПУНЬ ГЛУБОКОЙ ОЧИСТКИ, почему ВАЖНО наносить НЕЙТРАЛИЗАТОР! Почему волосы темнеют после окраски + ОМБРЕ СМЫВКОЙ + КАК ДЕЛАТЬ СМЫВКУ НЕ ЗАТРАГИВАЯ КОРНИ ВОЛОС 2015»

Эмульсия для удаления стойких красок с волос Estel Color Off - «УДАЧНЫЙ ОПЫТ 4 СМЫВОК с подробными фото ДО и ПОСЛЕ+ ЧЕМ ЗАМЕНИТЬ ШАМПУНЬ ГЛУБОКОЙ ОЧИСТКИ, почему ВАЖНО наносить НЕЙТРАЛИЗАТОР! Почему волосы темнеют после окраски + ОМБРЕ СМЫВКОЙ + КАК ДЕЛАТЬ СМЫВКУ НЕ ЗАТРАГИВАЯ КОРНИ ВОЛОС 2015»

В отзыве расскажу и покажу свой опыт применения эмульсии для удаления стойких красок Estel COLOR OFF, в отзыве Вы увидите как: 1) СМЫТЬ ХНУ С ВОЛОС 2) ЗА 1 ДЕНЬ СТАТЬ БЛОНДИНКОЙ 3) СМЫТЬ ЧЕРНУЮ КРАСКУ С ВОЛОС 4) СДЕЛАТЬ ОМБРЕ СМЫВКОЙ

А также в отзыве Вы узнаете :

А. Инструкция по применению смывки estel color off;

Б. Чем заменить шампунь для глубокой очистки волос;

В. О том, почему ВАЖНО НАНОСИТЬ НЕЙТРАЛИЗАТОР;

Г. Почему ВОЛОСЫ ТЕМНЕЮТ ПОСЛЕ ОКРАСКИ.

Д. КАК ДЕЛАТЬ СМЫВКУ НЕ ЗАТРАГИВАЯ КОРНИ ВОЛОС​

1. Опыт Первый. СМЫТЬ ХНУ - ВОЗМОЖНО! (август 2012)

Еще в январе 2012 мной была сделана попытка осветлить волосы, но желаемый результат тогда не был достигнут (про смывку я тогда еще не знала).

До осветления волосы на протяжении 2 лет окрашивались черной и каштановой хной LUSH. Многие мне тогда говорили, что смыть хну с волос не возможно, ее можно только состричь или отрастить. И я опять вернулась к каштановому цвету. Но я не из тех, кто быстро сдается и в конце июля 2012 года я предприняла еще одну попытку осветлить волосы. Купила стойкую крем-краску Brillance 813 жемчужно-серебристый блондин и на свой страх и риск покрасилась. Результат получился тот же, что и в январе – корни окрасились, а остальная длина - нет . Вот как ужасно это выглядело:

2012 год. До смывки краски

На мое счастье, тогда я уже знала о существовании смывки, поэтому я пошла в магазин профессиональной косметики и купила Эмульсию для удаления краски с волос Estel color off (цена 257 руб).

Эмульсия для удаления краски с волос Color off

Весь набор состоит из 3 флаконов: 1- Восстановитель, 2- Катализатор, 3 – Нейтрализатор.

Эмульсия для удаления краски с волос Color off

В инструкции написано, что через 40 минут после удаления красителя волосы готовы к окрашиванию.

Всю процедуру нужно проводить в перчатках, которых, кстати, нет в наборе.

Вооружившись всем необходимым, я приступила к смывке.

Сразу после смешивания восстановителя и катализатора при помощи мужа нанесла состав на волосы. Затем надела шапочку для душа и стала прогревать сверху волосы горячим феном. Через 20 минут мы стали «стягивать» состав с волос бумажными полотенцами, при этом белые полотенца окрашивались в бежево-зеленый цвет - это хна и басма покидала волосы:

2012 год. Полотенца с удаленной краской

Результат превзошел мои ожидания! Наконец-то волосы стали светлее! Я даже не думала, что на них было столько краски!

2012 год. После смывки краски

Осталось правильно затонировать получившийся желто-зеленый цвет.

Результат 1. Фото "ДО" и "ПОСЛЕ" смывки COLOR OFF :

1 смывка

Затем я состригла зеленые от басмы концы и затонировала волосы краской Estel Deluxe цвет 8/65 - Светло-русый фиолетово-красный (на фото коллаже внизу краска 8/65 уже сильно выгорела и подсмылась, т.к. в то время отдыхали на море)

Смывка хны 2012 год "ДО" Июль -"ПОСЛЕ" Август

2.Опыт Второй. Как ЗА 1 ДЕНЬ СТАТЬ БЛОНДИНКОЙ! (июль 2013)

После неудачного тонирования Estel DE LUXE Корректор 0/G Графит волосы стали каштанового цвета, который я решила смыть до светло-русого при помощи уже знакомой смывки Эстель Колор Офф. Вот какой каштановый цвет мне "подарил" Графит:

Цвет ДО смывки

В начале июля сделала 3 смывки за 1 день, после каждой смывки я сперва стягивала состав с волос бумажным полотенцем, затем полностью мыла голову несколько раз шампунем для глубокой очистки.

После первой смывки волосы стали рыже-желтыми:

2013 год. После 1 смывки (дневной свет у окна)

После 2 смывки волосы стали ярко-желтыми:

2013 год. После 2 смывки (со вспышкой)

2013 год. После 2 смывки (дневной свет у окна)

После 3 смывки я - бежевая блондинка!!!!

ПОСЛЕ 3-х смывок

2013 год.После 3 смывки (дневной свет у окна)

На следующий день покрасилась Estel De luxe 9.61:

После смывки и тонировки краской Estel De luxe 9.61

Результат второй смывки. Фото "ДО" и "ПОСЛЕ" смывки COLOR OFF :

2 смывка

3.Опыт Третий. Как СМЫТЬ ЧЕРНУЮ КРАСКУ С ВОЛОС! (октябрь 2013)

Проходив 2 недели блондинкой, я решила "сменить амплуа" и покрасилась в Каштановый 400 Кастинг Крем Глосс, но так как волосы были осветленные, то цвет получился слишком темный, практически черный. Сперва я думала, что он смоется с осветленных волос и станет таким, каким я и хотела- каштановым, но краска ни в какую не хотела вымываться. Волосы ДО смывки выглядели так :

смывка октябрь 2013 ДО (с укладкой)

И хотя мне этот цвет идет, но он меня угнетает, не могу быть жгучей брюнеткой больше 3 месяцев. И я решилась на еще одну смывку до каштанового цвета.

смывка октябрь 2013 ДО (без укладки)

Смывку делала 1 раз, до более светлого цвета смывать не стала, так как получившийся каштановый цвет меня полностью устроил.

После смывки:

смывка октябрь 2013 После (без укладки)

Результат 3. Фото "ДО" и "ПОСЛЕ" смывки COLOR OFF :

3 смывка (без укладки)

Смыть ЧЕРНУЮ КРАСКУ С ВОЛОС - РЕАЛЬНО!

4.Опыт Четвертый. Как СДЕЛАТЬ ОМБРЕ при помощи смывки! (март 2014)

Наступила весна - время пробуждения и обновления. И каждую весну мы с друзьями ходим в баню душа и сердце хочет (требует) перемен. Вот и в этот раз я опять взялась за смывку Но не стала торопиться и смывать краску целиком, а сделала смывку только на концах волос, чтобы получился новомодный эффект ОМБРЕ. (Подходит тем, кто имеет натуральные светлые волосы или ранее волосы были осветлены).

Равномерный эффект Омбре я достигла при помощи уже не раз опробованной мной технологии "хвостиков". Для этого мне понадобились сделать всего 3 хвостика, 1 на затылке и 2 по бокам.

И вот что из этого вышло:

март 2014 - Результат Омбре смывкой

Итог: Сделала ОМБРЕ без осветления волос. Эффект Омбре - есть, повреждение волос - практически нет. Ну, а когда и Омбре надоест, всё можно будет легко исправить при помощи.... очередной СМЫВКИ или Краски!!!

ЧТО ЕЩЕ НАДО ЗНАТЬ О СМЫВКЕ ЭСТЕЛЬ:

А. ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ

Восстановитель и катализатор смешиваете в соотношении 1:1, наносите на волосы, ждете 20 минут (можно с теплом). После чего нужно удалить состав с волос полотенцем и посмотреть результат. Если результат не достигнут, то повторно наносите свежий состав из 1 и 2 на 20 минут. Моете волосы большим кол-вом воды, наносите на прядь Нейтрализатор на 3 минуты, затем смываете и смотрите. Если цвет возвратился, то надо опять все начинать сначала... Если результат устраивает, то на подсушенные полотенцем волосы наносите Нейтрализатор на 3 минуты, смываете водой. Далее моете волосы 3 раза шампунем глубокой очистки, наносите бальзам.

Б. ЧЕМ ЗАМЕНИТЬ ШАМПУНЬ ДЛЯ ГЛУБОКОЙ ОЧИСТКИ.

Если у вас нет шампуня для глубокой очистки, его можно заменить обычным шампунем с добавлением соды (она повышает рН шампуня, чешуйки волоса открываются, краска лучше "выходит" из волоса). Соотношение такое: на одну ладошку шампуня 1 ст. ложку соды.

В. О ТОМ, КАК ВАЖНО НАНОСИТЬ НЕЙТРАЛИЗАТОР (СОСТАВ ИЗ 3 ФЛАКОНА)

Дело в том, что нейтрализатор- это оксигент с низким процентом оксида (около 1,5%), он показывает насколько разрушились молекулы краски в волосе (если краска смыта недостаточно, то он эти связи обратно соединит, а если достаточно - то окончательно закрепит разрыв между молекулами). Если пробная прядь после него темнеет, то надо продолжать делать смывки до тех пор, пока прядь не перестанет темнеть.

Г. ПОЧЕМУ ВОЛОСЫ ТЕМНЕЮТ ПОСЛЕ ОКРАСКИ.

При окрашивании после смывки в краску добавляется оксигент/активатор, который и выявляет не разрушенные молекулы прежней краски, соединяет их и волосы опять темнеют. Вот почему так важно наносить НЕЙТРАЛИЗАТОР (№3) и делать несколько смывок до тех пор, пока волосы не перестанут темнеть.

Д. КАК ДЕЛАТЬ СМЫВКУ НЕ ЗАТРАГИВАЯ КОРНИ ВОЛОС - Обновление 2015

Всё чаще в отзывах о смывке можно увидеть очень не симпатичный результат – светлые корни и тёмная остальная длинна волос. Это происходит от того, что девушки ошибочно начитают делать смывку сразу со всей длинны, не отступая от корней и кожи головы.

Тогда как правильнее начинать делать смывку надо с кончиков волос, и с каждым новым нанесением свежеприготовленного состава постепенно поднимать уровень нанесения смеси смывки.

Самый простой способ контролировать уровень нанесения смывки- сделать ХВОСТИКИ, тогда резинка будет своего рода уровнем, который поможет контролировать высоту нанесения смеси и не подняться выше заданного уровня (также этим способом я делала омбре смывкой в марте 2014 года).

Количество и толщина хвостиков определяется индивидуально, так как густота, толщина и длинна волос у всех разная.

Точно таким же способом, т. е. хвостиками, можно сделать смывку не затрагивая корни волос или отросшую длину.

Хвостики для смывки 🙂

А также с помощью хвостиков получается более равномерное и быстрое распределение смеси смывки на волосах.

Спасибо, за внимание. Надеюсь, что мой опыт смывок будет Вам полезен, если есть вопросы - обращайтесь, не стесняйтесь

Кислотная смывка для волос - ответы на вопросы - Женский Клуб

Кислотная смывка и принцип её действия.
"Кислотная смывка-что это,как это работает?Как это всё делается и почему же волосы потом темнеют или становятся рыжими?"-это основные вопросы которые задают девушки на форумах друг другу и специалистам вот уже несколько лет. Я попробую вам ответить максимально подробно и наиболее доступно,но это будет большая статья,поскольку процесс и его продолжительность напрямую зависит от правильного анализа ваших волос и желаемого результата.

Итак,начнём с того,что есть в ваших натуральных волосах до того,как вы их покрасите краской в любой цвет (исключаем осветление блонд-порошком).
В каждых волосах есть два пигмента.Один тёмный,другой светлый.В тёмных волосах тёмного пигмента много,а светлого мало,в светлых,соответственно,наоборот-светлого много,а тёмного мало.
когда вы красите волосы краской,то воздействуете на эти пигменты и они "сгорают".Тёмный становится красным,а светлый-жёлтым.И поэтому в волосах появляется фон.В очень тёмных волосах этот фон красный,волосах посветлее (тёмно-русый,русый) фон рыжий,а в светлых волосах он жёлтый.
Но мы этот фон не видим,поскольку искусственные пигменты краски перекрывают нам видимость.Хотя некоторая часть всё-таки проявляется-например,многие замечали,что красились в коричневый,а получали коричнево-рыжий. Красились в тёмно-русый,а получали тёмный с рыжиной.Или много казусов,когда красят в серые оттенки,а полуают или натуральный или с той же рыжиной.Ещё хуже,когда при окрашивании получается зелёный фон-это очень часто происходило при окрашивании светлых волос или осветлённых (жёлтых) в серые (пепельные) оттенки.Почему?Потому что в красках серого оттенка пигмент синий,а при окрашивании светлых волос,он визуально смешивается со сгоревшим жёлтым фоном и получается зелёный.То есть происходит обычное "визуальное"смешивание оттенков.
Немного отвлекаюсь...
И вот при различном окрашивании девушки в какой-то момент понимают,что хотят что-то поменять.Темноволосым хочется стать блондинками,блондинкам хочется стать рыжими (потом им это не нравится и они хотят вернуть обратно свой блонд).Вот тогда и применяется безопасная кислотная смывка,чтобы волосы оставались здоровыми,а желаемое достигнутым.

1)Итак,что же делает кислотная смывка?
Она выводит искусственный пигмент краски из волос. При этом она никак не воздействует на натуральный,но уже "сгоревший" пигмент в волосах.То есть волосы она не осветляет,а так же натуральный цвет,который у вас был до покраски,она вам не вернёт.Но после смывки вы увидите как выглядит ваш "сгоревший"пигмент" (вспоминаем что написано выше-насколько тёмные ваши волосы,настолько волосы будут рыжее или краснее).

2)Когда можно начинать использовать кислотную смывку?
Только через месяц после последнего окрашивания волос,потому что смывку наносят на волосы,отступая 1см от кожи головы.

3)Как делать смывку в домашних условиях?
У разных производителей кислотные смывки абсолютно одинаковые по смыслу работы,но разные по выполнению.
Сам процесс одинаков у всех кислотных смывок-смешиваем два флакона в неметалической посуде,обязательно в равных пропорциях.Быстро наносим по длине,отступая от кожи головы 1см.Одеваем полиэтиленовую шапочку и греем феном 20 минут.потом смываем 5 минут горячей водой,моем шампунем,смываем водой и моем шампунем,смываем и моем и так 5 раз подряд. Затем,не нанося никаких средств,подсушиваем полотенцем и сушим феном и только потом аккуратно слегка расчёсываем расчёской с редкими зубьями.Дело в том,что после смывки волосы становятся сухие,как пакля и жутко путаются.Но этого не надо бояться,потом в конце процедур вы нанесёте маску и волосы станут шелковистыми.
Теперь про различия-у одних производителей в день допускается 5 смывок подряд(например Эстель),у других 3 раза (BRELIL).После одних смывок между ними надо волосы подсушивать,остужать и ждать 20 минут перед последующим нанесением (тот же Эстель),у других хоть и допускается только три раза,но сразу подряд,слегка подсушив волосы феном (BRELIL).Опять же покраска-после одних надо ждать сутки-двое,после других можно красить сразу.
То есть при приобретении смывки ориентируйтесь на то время,которое вы готовы тратить на кислотную смывку.Эстель затягивается на весь день,а BRELIL на пол-дня.И обязательно соблюдайте инструкцию!!!!

4)Как определить сколько смывки вам понадобится?
Вопрос сложный. Никто и никогда вам на 100% не скажет сколько именно смывки вам надо купить,чтобы вывести всю краску из волос.
Почему?Когда вы красите волосы,то первый раз красите всю длину.На следующий раз прикорневую отросшую часть и протягиваете по длине.И так с каждым разом.
Что получается?С каждым разом вы вводите всё новые и новые пигменты краски "слоями" на ранее окрашенные волосы,получается накопительный эффект,особенно это видно на нижней части волос-там цвет всегда насыщеннее и иногда даже темнее,чем в верхней части волос.То есть самое большое количество краски находится примерно от середины длины волос до низа.И вот туда и будет потрачено основное количество кислотной смывки.
Так же на количество смывки очень сильно влияет и выбор краски.Если это были профессиональные краски,то они выводятся быстрее.Особенно,если краска от того же производителя,что и смывка.Но если вы красили красками из обычных магазинов,да ещё и чёрными,да ещё и около года и больше,то процесс выведения пигмента может затянуться на пару месяцев,а то и больше.

5)Почему так долго смывать краску?
Процесс смывки основан на таком действии-наносят состав на волоcы,греют.Состав проникает в волосы,разрушает связи (соединения) искусственного пигмента краски и потом вымывается горячей водой и шампунем глубокого очищения.
Моются волосы 5 раз подряд.Очень горячей водой и шампунь для профессионального применения.И так несколько раз подряд-наносим,греем,смываем.То есть представьте себе как вы моете гору посуды руками очень горячей водой и концентратом моющего средства....И так 5 раз.Перерыв (замочили посуду),опять 5 раз горы посуды,опять перерыв,опять 5 раз.И всё это без перчаток.Понимаете что происходит с кожей рук?То же самое происходит с кожей головы.Поэтому после кислотной смывки,которую в один день делают от трёх до пяти раз подряд,будет ощущение сухости,стянутости кожи.Ей необходимо время для восстановления.Обычно это три дня.То есть между теми днями,когда вы делаете смывку,обязательно должен быть перерыв.Соответственно,срок выведения краски уже увеличивается за счёт этих перерывов.

6)Как вы будете выглядеть после процедуры?
по мере выведения искусственного пигмента,волосы будут преобретать различные оттенки,но всегда с одним направлением-более светлый верх и более тёмный низ.То есть плавный переход от светлого к очень тёмному.И с каждым разом будет светлый продвигаться вниз.Самый трудный участок и самый долго выводимый именно низ.Иногда бывают случаи,когда после двух-трёх смывок цвет вообще не изменяется,то есть выглядит так,как буд-то ничего не происходит.Это может быть по двум причинам-или вы уже всё смыли или процесс визуально "застрял" на месте,но на самом деле всё работает и надо продолжать и продолжать.


7)Как сделать приличный вид волос между смывками?Ведь вы же ходите на работу,учёбу,просто по улице.И вам надо выглядеть прилично,не ходить разноцветным рыжим клоуном.Для этого берётся оттеночный шампунь или оттеночная маска любой профессиональной линии и очень тёмного цвета(обычно это тёмно-коричневый цвет).Наносите на 10 минут после последней процедуры смывки (последней на тот день,когда делали) и потом смываете водой и наносите маску на волосы.

8)Почему волосы опять темнеют?
Происходит это в двух случаях.Волосы могут темнеть после смывки уже за первую ночь или при покраске волос,если смывка не доделана.
За ночь связи недомытого искусственного пигмента опять стягиваются и происходит обратное сцепление пигментов,что на утро проявляется как потемнение волос.Пугаться не стоит.Это нормальный процесс.Объясню проще-смотрим на банку с зёрнами кофе.Но смотрим снизу на донышко.Мы видим зёрна кофе.Достаём из банки половину зёрен и опять смотрим на донышко-оттуда не видно,что кофе уменьшился по количеству,но мы знаем,что в банке уже меньше зёрен.Точно так и с волосами-мы убрали определённое количество искусственного пигмента,но мы не видим сколько,но знаем точно что его там уже меньше.То есть потемнение волос на утро не должно вас пугать-на результат это не влияет.
При покраске волос с недоделанной смывкой перекись воздействует на связи искусственного пигмента и они восстанавливаются.Поэтому при окрашивании цвет "возвращается". На этом же воздействии и проверяется доделана смывка или нет.

9)Как понять,что смывка доделана?
Во-первых это видно визуально.Цвет по всей длине волос должен быть однородным,не должно быть тёмных участков и отличия цвета по длине и особенно на концах.
Во вторых достаточно провести тест прядь на затемнение.Но не одну,а несколько.Когда вы сами красите себе волосы,то наиболее доступный участок для вас у лица-лоб,виски и макушка.То есть при самостоятельном окрашивании вы накапливаете пигменты краски именно на этих участках и из практики эти участки,при самостоятельном выполнении смывки,наиболее трудно выводимые.
Поэтому берём любой оксилан (окислитель,перекись-называйте как вам удобно) с 3% значением (иногда пишут 10 vol),и наносите на несколько прядей-у лба,на висках,на макушке и на затылке.Держите 15 минут и смываете с шампунем.Если пряди потемнели,особенно в нижней части волос по длине,значит надо смывку продолжать.
Так же очень полезно делать "закрепление" результата оксиланом. Обычно производители рекомендуют это делать в заключении смывки на тот день,когда делали,но при этом волосы опять темнеют.Поэтому многие дамы этот совет игнорируют.Так же закрепление делают когда смывка полностью доделана,пигмент краски полностью вымыт и в тот же день вы не планируете красить волосы.

10)Если смывку доделали,чем красить дальше?
И вот тут появляется много вариантов,которые напрямую зависят от вашего фона "сгоревшего" пигмента и от желаемого оттенка.
Данная тема тоже очень большая и я напишу её отдельно.

11)Если волосы были ранее осветлённые (или мелированные) и потом окрашены,можно ли делать кислотную смывку?
Если вы были блондинкой и ваши волосы были полностью осветлённые,а потом вы их закрасили и,поняв,что это вас не устраивает и вы хотите вернуться к прежнему блонду,то кислотная смывка вам не только сохранит качество волос,но и вернёт вас к изначальному виду.
Но если у вас было мелирование и вы его закрасили,то смывка смоет вам краску,но мелирование так и останется мелированием,а вот остальные волосы,которые ранее ни разу не осветлялись,но были закрашены,дадут в итоге тот самый "сгоревший" пигмент.

12)Тонирующие средства и хна в работе со смывкой.
Кислотная смывка не работает ни с хной,ни с тонирующими,оттеночными средствами.Но очень часто мне задают вопрос:"А как тогда вы советуете использовать оттеночный шампунь между смывками?".Оттеночный шампунь или оттеночное средство вымывается в процессе следующей кислотной смывки за счёт горячей воды,шампуня глубокой очистки и многоразового мытья головы.

13)Если в процессе выполнения кислотной смывки выявляется аллергия ,что делать тогда?
Обычно тест на переносимость компонентов проводят за сутки.Наносится по капле каждого состава на сгибе локтя или за ухом.Достаточно подержать пол-часа,чтобы уже понять как вы воспринимаете запах и сам состав при попадании на кожу.Если появляются признаки жжения в глазах,слезливость.удушье,то смывка вам противопоказана.Если же аллергия выявляется в процессе работы со смывкой,тогда возможно два варианта-либо красить обратно в тот цвет,который был (тёмный),либо выполнять долгое и упорное блонд-мытьё (или осветление волос). Оно приостановит процесс и сохранит уже достигнутый результат.При нанесении состава блонд-мытья волосы сначала темнеют,но через 3-5 минут начинают светлеть.Если не светлеют,тогда состав стягивают и наносят новый.
После этого можно тонировать или красить,но только в возможный в данной ситауции цвет.

14)Как убрать из волос неприятный запах после смывки?
Сильный стойкий запах свидетельствует об нарушении выполнения смывки.Либо вы использовали не профессиональный шампунь глубокой очистки,а обычный.Либо вы мало смывали водой или вода была недостаточно горячей.
В данной ситуации можно только посоветовать использовать ароматные маски и пробовать ополаскивать волосы с разведённым уксусом (столовая ложка на литр воды).
Обычно через месяц запах пропадает сам.

Все, что нужно знать о смывках краски с волос

Собираясь поэкспериментировать с цветом локонов, каждая девушка пытается представить себя в новом образе. Но что делать в том случае, если выбранный цвет не подошел к лицу, или оттенок получился совершенно не тот, которого ожидали? Не всегда есть возможность перекрасить волосы другой краской и исправить результат. В этой ситуации, чтобы вернуть прежний цвет волос, используют средства для удаления краски, способные химическим путем выводить искусственные пигменты.

Смывка краски для волос: как действует

Первое, что стоит знать о смывках, это их принципы влияния на волосы. Каждый продукт для удаления краски является активным составом (по своей сути, химией), который, конечно, особую пользу для здоровья волос не дарит. Его компоненты работают на молекулярном уровне и вытягивают искусственные пигменты неудачно подобранной краски, оставляя при этом родной цвет волос неповрежденным.

Таким образом, отросшие натуральные корни не испытают никакого дискомфорта и останутся натурального цвета, а остальная длина волос вернет свой исходый цвет. Если удаляемый цвет имел темный или черный оттенок, то нужно быть готовым к тому, что после первой попытки смыть краску, придется этот процесс повторить еще пару раз.

Конечно, максимально удобным будет использовать смывку краски в тех случаях, когда нужно просто немного подкорректировать, выровнять или немного «снять» цвет окрашенной шевелюры. В таком случае влияние на волосы будет одноразовым и минимальным, а, следовательно, большой опасности процедура не представляет. Стоит помнить, что средства для удаления краски не содержат компонент аммиака и не осветляют волосы более, чем их исходный тон перед покраской. Многие путают воздействие осветляющих препаратов со смывками краски, надеясь в результате получить блонд.

Два уровня смывок

Фирмы-профессионалы предлагают два типа средств, предназначенных для удаления результатов неудачной покраски. Они различаются между собой по степени проникновения в структуру волос и силе воздействия на красящий пигмент.

Итак, это глубокая и поверхностная смывки. Судя по названию, можно догадаться о практическом результате каждой из них.

  • Поверхностная смывка

Поверхностная — это щелочная смывка. Легкая поверхностная, или щадящая, смывка краски будет эффективна для волос, требующих небольшой корректировки: немного убрать яркость цвета, осветлить на один тон или убрать оттенок. При обработке волос таким средством структура их не нарушается, так как в составе щадящей смывки нет окислителей. Обычно смывание краски начинают именно с этого типа средств. Потому что таким образом волосы не получают вредного воздействия, а результата вполне может оказаться достаточно без использования более агрессивных средств.

  • Глубокая, внутренняя смывка

Внутренняя смывка — это обесцвечивание, т.е. декапирование, ее стоит делать у профессионала и в крайнем случае. При удалении краски продуктами внутренней смывки, нежелательный цвет будет уходить, несомненно, более быстро и заметно, но и вред наносится довольно ощутимый. Это происходит благодаря сильным активным химическим веществам, называемым окислителями. Они буквально «приподнимают» чешуйки волос, проникают внутрь их стержня, обволакивают собой искусственные пигменты краски и вытягивают не понравившийся цвет. Более сильный состав обычно применяют для удаления темных и черных оттенков с волос, причем процедура эта может проводиться до трех раз подряд, прежде чем волосы получат необходимый цвет.

Если вы красились до года, то можно применить 1 смывку. Если вы окрашивали волосы 2-3 года, то, скорее всего, нужно будет выполнить 2 смывки или декапирование, и цена на средства, соответственно, возрастет. Если проводить две смывки, то лучше делать это с перерывом на 2 недели.

Вследствие того, что смывки краски с волос негативно воздействуют на их структуру, производители добавляют в состав различные питательные добавки и восстанавливающие компоненты, способные свести к минимуму вред, наносимый этими средствами. Поэтому профессионалы в своем деле: Paul Mitchell‎, Loreal, Estel, Dikson, Sebastian, Goldwell и другие фирмы мирового значения выпускают средства различного характера: эмульсии, смывки, корректоры, средства для декапажа и другие.

Доступные и действенные смывки:

Color off фирмы Estel
Colorianne Color System от бренда Brelil
Backtrack фирмы Paul Mitchel
Remake Color от Hair Light
Обесцвечивающее масло Vitality’s
Art Color Off от Vitalitys
Colorianne Color System фирмы Brelil
Cредство для декапирования Efassor Special Coloriste от L`Oreal
L`Oreal Eclair Clair

Широкий выбор средств для снятия краски с волос представлен в интернет-магазинах для парикмахеров. Здесь можно найти мировые бренды, предлагающие уникальные продукты по интересной цене.

Смывать краску с волос – дело довольно деликатное, поэтому стоит, конечно, довериться профессионалам.

Видео ролики с реальным опытом по смывке краски с волос

Опыт смывки Estel Color off

Лучшие смывки для волос в домашних условиях

Смывка краски (на языке колористов – декапирование) проводится при помощи веществ, разрушающих цветовой пигмент. Средства для декапирования бывают обесцвечивающие и кислотные. Первые предназначены для салонного применения, а последними вполне можно пользоваться в домашних условиях. Мы собрали три лучшие кислотные смывки для волос.

1. Estel Color Off

В кислотных смывках, к которым относится и Color Off, нет аммиака, поэтому их легко применять самостоятельно с минимальным риском повредить волосы. Средство от марки Estel действует только на искусственный пигмент, оставляя неизменным натуральный. Набор содержит 3 пронумерованных флакона: восстановитель, катализатор и нейтрализатор. Прилагается удобная инструкция по использованию этих трёх фаз. Если ваши волосы были окрашены в тёмный оттенок, возможно, смывку придётся повторить несколько раз. Отзывы говорят, что Estel Color Off отлично справляется со стойкими профессиональными красками.

2. Kapous Dexocon2 Faze

Смывка для волос Kapous используется для полной или частичной коррекции цвета. Чтобы добиться максимального результата, применять средство рекомендуется в течение 24 часов с момента окрашивания. Повторять процедуру декапирования с этой смывкой можно до четырёх раз в день. Две фазы следует перемешивать в равных частях и строго соблюдать инструкцию.

3. Paul Mitchell Backtrack

Профессиональная кислотная смывка для волос от Paul Mitchell позволяет легко корректировать неудачное окрашивание. Производитель заявляет, что средство гипоаллергенно и абсолютно безопасно. Как и смывка Estel Color Off, этот препарат содержит 3 фазы: ремувер, нейтрализатор и база для защиты волос. Судя по отзывам, продукт не вредит прядям и без труда избавляет от нежелательного пигмента, после чего волосы вновь готовы к экспериментам.


Косметик-ПРО

Запись на семинары и курсы по телефонам:
+7(351)200-444-7
8-964-24-23-733 - Viber/ WhatsApp.
Наш адрес: Челябинск, Агалакова, 34 (ост. Дом обуви)

Авторский семинар Евгении Томиловой
"ВСЕ ОТТЕНКИ СЕРОГО"

Надоел теплый блонд? Хочешь научиться создавать идеальные холодные оттенки? Проходи online-обучение у топового колориста Учебного центра "Косметик'PRO"

В программе обучения: теория и практическая демонстрация на модели! Вы станете свидетелем трансформации цвета. Готовы?

Получение базы для создания серого оттенка на разном уровне.
Перезагрузка: из теплых оттенков в холодные.
Рецепты серых оттенков от графитовых тёмных до перламутровых серебристых.
Коктейли и сочетания с холодными (пепельными) цветовыми направлениями.
Разбор ситуаций: в каких случаях можно добиться холодных оттенков, а где нет и почему.

Стоимость: 1500 р.

КОЛОРИСТИКА от ESTEL Professional
Дистанционный урок 1. КОЛОРИСТИКА: Работа красителей DE LUXE и PRINCESS ESSEX. Основная палитра.

Технолог-эксперт Estel - Елена Рыкова

Хочешь окунуться в мир колористики? Желаешь научиться правилам вторичного и первичного окрашивания волос? Хочешь изучить технологию окрашивания волос краской DE LUXE и PRINCESS ESSEX? Проходи дистанционное обучение у технолога-эксперта ESTEL Учебного центра "Косметик'PRO"

В программе обучения: теория и практическая демонстрация на модели!

Теоретическая часть:
Строение волоса. Типы пигментов.
Первичные и вторичные цвета. Нейтрализация
Система нумерации. УГТ и цветовое направление
Работа перманентной краски
Перманентные краски PRINCESS ESSEX. Палитра оттенков.
Перманентные краски DE LUXE. Палитра оттенков.
Полуперманентная краска SENSE DE LUXE. Палитра оттенков. Применение краски.
Применение оксигентов и активаторов.
Стабилизированный оксидант. Мордонсаж
Цветные корректоры: нейтрализация цвета
Цветные корректоры: усиление яркости цвета.
Самостоятельное применение цветных корректоров
Аммиачный корректор 0/00А. Применение.
Нейтральные корректоры 0/00N . Применение.

Совместимость услуги окрашивания с типом волос
Применение технической серии

Занятие состоит из трех частей:
1. Видео-урок: теоретическая часть
2. Видео-урок: демонстрация окрашивания на модели
3. Тестирование по материалу урока

Стоимость: 200 р.

Из брюнетки в блондинку, без вреда для волос

Без магии и волшебства, расскажут на обучении технологи-эксперты Estel Наталья Шитякова и Елена Прохорова.

Дистанционный урок: ПЕРЕЗАГРУЗКА ЦВЕТА с системой Color Off
В программе обучения: теория и практическая демонстрация на модели!

Теоретическая часть:
Что такое кислотная смывка? В каких случаях она выполняется. В каких случаях понадобится щелочная смывка.
Этапы выполнения смывки. Как понять, что "цвет ушел". Почему цвет возвращается
Заключительный этап процедуры
Особенности окрашивания волос после смывки

Занятие состоит из трех частей:
1. Видео-урок: теоретическая часть
2. Видео-урок: демонстрация окрашивания на модели
3. Тест по материалу урока

Стоимость: 200 р.


Авторский ДИСТАНЦИОННЫЙ семинар Екатерины Рыбченко
"СТРИЖКА "ПИКСИ"

Проходи online-обучение у топового преподавателя Учебного центра "Косметик'PRO"

В программе обучения: демонстрация на модели ПОШАГОВОГО разбора стрижки! Вы станете свидетелем трансформации формы. Готовы?

Стоимость: 1500 р.


Авторский ДИСТАНЦИОННЫЙ семинар Ульяны Никитиной
"БОТОКС, КЕРАТИН, НАНОПЛАСТИКА"

Хочешь научиться создавать идеально гладкие, прямые и блестящие волосы? Проходи online-обучение у топового преподавателя Учебного центра "Косметик'PRO"

На семинаре вы узнаете:
Описание процедуры.
Технология выполнения процедур.
Рекомендации Salon Royal Hair (калькуляция, техника продаж).
Продукты и оборудование для процедуры (описание свойств).
Подробный разбор домашнего ухода для клиента.

Занятие разделено на
теоретическую часть (видео)
демонстрационную часть (видео)
индивидуальную онлайн-консультацию

Ничего не найдено.

виды, способы применения, ошибки при выполнении декапирования

Индустрия окрашивания волос шагнула в век высоких технологий, но все еще можно встретить самые неожиданные результаты после применения того или иного продукта. Более того, женщины — существа импульсивные, им свойственно желание меняться, поэтому частое окрашивание становится нормой. Но что если необходимо перейти из темного в светлый оттенок или удалить неудавшийся результат? Сегодня не нужно терпеливо отращивать локоны, существует достаточное количество смывок для волос, способных творить чудеса.

Глубокое декапирование

Процесс смывки окрашенных волос подразумевает частичное удаления пигмента. Если локоны были окрашены много раз, намешано немало составов, если краски использовались из серии масс-маркет, то без глубокого внедрения в структуру, не обойтись. Для этих целей используется щелочная смывка для волос.

По сути, это осветление на супре. Производители выпускают массу порошков и кремов, которые содержат обесцвечивающий компонент, стабилизатор реакции и активатор. Их задача осветлить волосы на 2-3 уровня. Применяется такое декапирование однократно. Если результат не достигнут, повторное осветление допустимо не ранее, чем через неделю.

Главная ошибка тех, кто прибегает к глубокой смывке для окрашенных волос в домашних условиях — это применение агрессивных составов. Перекись водорода и 9-12% оксигент просто «убьют» стержень. Принцип действия щелочной смывки заключается в создании термической реакции внутри волоса, под действием которой расщепляется пигмент. Можно «открыть дверь с ноги» и жутко повредить ее. Но гораздо лучше делать это аккуратно. Поэтому предпочтительней щадящий состав на 1,5% активаторе. Он действует дольше, но бережней.

Вторая ошибка непрофессионалов — неправильная технология. Нельзя просто нанести состав, выдержать и смыть. Скорей всего, вы получите неровный цвет с пятнами и горящими корнями. Нанесение щелочной смывки для темных волос начинается с кончиков, спустя время состав наносится на корни. На светлых локонах без отросших корней, можно распределять состав равномерно. Время зависит от исходного цвета и состояния локонов, наличия отросших корней. Примерно через 20 минут (среднее время) состав стягивается с прядей — руками выжимается и протягивается по длине.

Щелочное декапирование противопоказано, если:

  • имеются заболевания кожи головы;
  • локоны ломкие, посеченные;
  • если ранее было произведено окрашивание красками, содержащими металл («Фара», хна).

Смывки для глубокого декапирования волос — идеальный вариант для тех, кто пытается перейти из черного цвет в блонд, а также для базы пшеничного оттенка при переходе в нордический холодный.

Кислотная смывка для щадящего декапирования

Самые знаменитые декапирующие составы для поверхностного удаления цвета — это Эстель и Капус. В их основе лежит кислота. Под ее действием чешуйки поднимаются, пропуская состав внутрь, где он мягко воздействует на искусственный пигмент. Для «родного» цвета такая смывка для волос бесполезна, вы получите результат практически такой же, как при применении народных методов. Так как в реакции отсутствует повышение температуры, нет риска разрыва стержня, значит, опасность его испортить очень маленькая.

Недостаток кислотных смывок — необходимость многоразового нанесения. Для осветления на 5 тонов понадобится сделать не менее 5 процедур. А если локоны длинные, то расход состава увеличивается.

Технология нанесения смывки Эстель колор Офф довольно проста, но требует терпения. В коробке 3 флакончика. Смешивать необходимо № 1 и 2. Эмульсия наносится на сухие, чистые волосы. Предположительное время воздействия — 20 минут. После чего стяните салфеткой состав с одной небольшой прядки и нанесите на нее немного средства из флакона № 3. Если цвет уйдет в затемнение, то, не смывая основной нанесенной эмульсии, наносите смесь из восстановителя и катализатора повторно. Через 20 минут повторите тест. Несмотря на то что инструкция Эстель гласит о повторении процедуры до получения положительного результата, делать этого не стоит.

Если после 40 минут прядь все еще темнеет от нейтрализатора, то просто смойте все с применением шампуня глубокой очистки. Если такого нет, добавьте в обычный пищевой соды в соотношении 1:1. Увлажните шевелюру бальзамом. Не используйте нейтрализатор! Через 40 минут отдыха начните процедуру заново. Итак, до тех пор, пока волос не перестанет темнеть после нанесения состава из флакона № 3. Как правило, для перехода из жгучего черного в оранжево-рыжий цвет на 5-6 уровне, необходимо 5-6 смывок для волос.

После нанесения нейтрализатора на все волосы, необходимо выдержать 3 минуты и смыть его водой и шампунем глубокой очистки. После его многоразового использования лучше не касаться кожи головы, она и так пересушена. Мойте только волосы. Тщательно сдобрите локоны бальзамом. Можете нанести маску на 20 минут.

Через 40 минут ваша шевелюра готова к дальнейшему окрашиванию. Если получившаяся база устраивает, значит, можно наносить краску сразу. Важно выбрать цвет на 1 тон светлее желаемого. В случае добавления микстонов лучше взять состав на 2 тона светлее. Когда базовый цвет недостаточно светлый либо в нем слишком много желтых (оранжевых) пигментов, проводят легкое щелочное декапирование осветляющей пудрой (1 часть) и 1,5% активатором (6 частей).

Кислотное декапирование — долгий процесс, но состояние волос после него значительно лучше, чем после щелочного.

Народные рецепты по удалению нежелательного оттенка

Осветлить волосы на полтона, смыть верхний слой краски, чтобы сэкономить на дорогостоящих составах, при этом не повредить волосы, помогут народные методы декапирования.

  • Мед и корицу хорошо использовать на темных волосах. Для состава необходимо 2 ст. ложки меда, 2 ч. ложки корицы, немного бальзама, чтобы довести смесь до состояния удобного при нанесении. На чистые сухие волосы наносится смесь и укутывается полотенцем. Время выдержки не более 2 часов, так как мед немного сушит волосы. После удаления смывки-декапирователя для волос шампунем, нанесите бальзам. Повторять процедуру необходимо 2 раза в неделю на протяжении 1 месяца.
  • Маски из обычного кефира без каких-либо добавок способны убрать желтизну у блондинок и осветлить немного шатенок. Принцип их действия основан на проникновении в структуру волоса молочной кислоты. Состав может выдерживаться достаточно долго, до 5 часов. После чего смывается шампунем.
  • Лимонный сок — средство для блондинок 8-10 уровня. Его просто наносят на сухие волосы и ждут 20 минут. Если посидеть немного на солнышке, то эффект заметен практически сразу.

Все народные рецепты рассчитаны на длительное применение. Если вы хотите изменений здесь и сейчас, то следует осуществлять выбор из химических способов декапирования.

Какие бы смывки для окрашенных волос вы ни выбрали, помните, нет ни одной, которая не вредит волосам. Даже альтернативные «маски» подсушивают волосы и оказывают раздражающее действие на кожу головы.

Моё перевоплощение в серую мышку | Отзывы покупателей

Девочки, хочу поделиться своей радостью: «Я наконец-то русая!» Не поверите, как я счастлива… Поймут меня те, кто долгие годы красит волосы в тёмный цвет, но мечтает о своих родных… натуральных… здоровых волосах.
Начало я уже писала в этом посте

В общем, началось всё с того, что я пошла в парикмахерскую и попросила сделать мне смывку на пару тонов, чтобы из горького шоколадного выйти в более натуральный и более холодный оттенок, «оживить» цвет. Смывку сделали Лореалем, после голова чесалась ещё месяц, жуть( В целом, цвет стал живее, но не натуральный… Плюс, вместо того, чтобы оживить цвет, она мне его наоборот «омертвила», так как зачем-то закрасила мне тоненькие прядки обратно в тот же цвет, что и был, так что выглядели они как будто их и не смывали. А так как они были сверху, то и затемняли всю картину… Я поняла, что не могу остановиться и хочу более натуральный и светлый цвет, свой цвет… родной пепельно-русый.

Через месяц лечения (скажу, что смывка подсушила мне немного концы, но эту проблему я быстро устранила) я решила смыть цвет сама. Купила смывку Estel Color off. (Скажу, что после эстеля голова чесалась всего пару дней, и не так сильно, лореаль жёг кожу головы так, что мне выть хотелось) За три раза получила светлый апельсин на своей головушке)

Затем, начитавшись «умных» советов, решила не экспериментировать и пойти краситься к парикмахеру. Все почему-то советуют идти к мастеру, пугают непредсказуемыми результатами, а, по факту, не учитывают того, что эти «специалисты» в большинстве своём — криворукие неучи.
В общем, просила я пепельный русый, а получила рыжий у корней в районе 7-ки и каштановый на концах на уровне 4-ки… Я была в шоке. Но поискав в интернете, да и здесь, на косметисте, убедилась, что это не мой мастер такой… так как в точности такой же результат я увидела на многих девочках… Такое ощущение, что «мастера» вообще не умеют ничего, кроме как взять оксид и смешать с краской, в которую ты ткнёшь пальцем…

Полечила я волосы месяц и решила, что не буду больше мучиться со смывкой. Во-первых, пигменты вымываются, структура волоса нарушается и он начинает тянуться, то есть, его нужно обязательно чем-то забить. Во-вторых, с рыжей пигментацией ничего не сделаешь и она будет вылезать, чем ни красься. Удержать пепельный на таких волосах практически невозможно.

Купила Wella Blondor крем c экстрактом ромашки. Крем на масляной основе, мягко и равномерно осветляет волосы. Я использовала оксид — 6%. Кожу не жгло совершенно (использовала эстелевские оксиданты)
В первый раз волосы осветлила до светло-рыжего, как у лилу из пятого элемента. Второй раз — на уровне 10-ки где-то… Корни и концы сравнялись. На фотографии виден лёгкий персиковый отлив НО в реальности его было не видно совершенно.


Купила лорель преферанс — цвет 8,1 — светлый пепельный русый. Просто я так боялась стать опять тёмной, что решила подстраховаться и взять на тон светлее. Что могу сказать? Во-первых, я сглупила и красить таким высоким уровнем оксида мне было не за чем… Кожу жгло сильно, жудко бил в нос запах аммиака… Но муж был в восторге оттого, как сильно похож был цвет на коробочке с цветом моих волос. Всё ходил и расхваливал краску, но говорил, что цвет мне совершенно не идёт)

дневной свет
вспышка
Через неделю я купила 1,5 % оксид concept и безаммиачную краску cutrin цвет 7,1 пепельно-русый… Видимо, передержала и получилась на 2 тона темнее, на уровне 5-6. Но я так была счастлива! Мои глаза вновь засияли, стали выделяться, кожа преобрела здоровый вид (а не красный, как было со светлым цветом, и не болезно-зелёный, с чёрным) цвет был холодный, с серебристым отливом, всё как я хотела.


Сравнивала с натуральным цветом мужа — точь в точь! Разница небольшая в отливе. У меня более русый, зеленоватый, у него более розоватый, перламутровый. (Также у кутрин есть цвет 6,16, тёмный русый с фиолетово-пепельным отливом. Вот когда он вымывается нет зелени совершенно, а цвет приобретает именно перламутровый натуральный оттенок. Но для меня всё же темноват… вот был бы 7,16… эх...) Но все думают, что это мой натуральный цвет. За несколько помывок цвет стал светлее, на уровне 7-8-ки.


Плюс, я пользуюсь шампунем yves rocher с васильком для серых и седых волос и он даёт такой серебряный отлив и блеск. Мне очень нравится!
В общем, отращиваю теперь свои родные волосы, а пока ещё пару раз точно буду тонировать кутрином, и лечить-лечить-лечить!
В итоге, волосы стали чуть сечься, но я подравнялась, поделала масочки-ампулки и волосы стали опять мягкими, элаcтичными и здоровыми!

ПС… Если хотите уйти из чёрного/шоколада/рыжего в натуральный цвет совет: не заморачивайтесь со смывками. Во-первых, цвет получится всё равно рыжий, из него сложно получить холодный тон, тем более не стоит идти к парикмахерам, на словах они могут всё, а на деле у каждой девочки русый — это почему-то рыжий каштан в итоге… Во-вторых, смывка вымывает из структуры волоса окрашенные пигменты, волосы начинают тянуться и ещё бог знает что… Это пишут, что безвредно, а по факту, ещё можно поспорить… Тем более этих смывок сделаете раз 5-6… А это уже чревато. После смывки сложно подобрать цвет, так как по факту он получается не однородным и темнее задуманного.
Лучше обесцветиться один раз профессиональным блондором, который не жжёт кожу головы (а это главное, волосы мертвы, а вот кожа после смывки горит… понятно, что это не полезно, мягко говоря) И тонироваться уже без опаски стать зелёной или серо-буро-малиновой… Цвет ложится хорошо.
С вами была я, Маффи) Конечно же на «ТЫ»))

Dino Kids Dental, доктор Эстель Хвэйван Лиу


Доктор Эстель Хвэйван Лиу

Доктор Дэвид Паттерсон


Детский стоматолог, сертифицированный советом директоров

дипломатов Американского педиатрического совета Стоматология

USC - Детская больница Лос Анхелес

участников AAPD CSPD USC / PDA CDA SGVDS CADSSC


Телефон: 626-788-9008

Факс: 626-873-9632

9428 Valley Blvd.# 101. Роузмид, Калифорния 91770

[email protected]

БЕЗ ИГЛЫ ВПРЫСКА

NumBee - это будущее безболезненной анестезии

Пациенту

  • Без игл, без инъекций - отлично подходит для педиатрических пациентов, пациентов с нарушениями свертываемости крови и любого пациента, который сильно боится игл.

  • Локальная анестезия - онемение ограничивается зубом, над которым стоматолог должен работать, что исключает необходимость инфильтрации или блокирующих инъекций.

  • Ограниченная анестезия мягких тканей - дискомфорт, связанный с онемением губ, десен и щек при анестезии мягких тканей, является частой жалобой среди всех пациентов. Используя NumBee, большинство пациентов не испытывают анестезии мягких тканей и побочных эффектов, которые могут быть связаны с этим дискомфортом после завершения стоматологической процедуры.

ЦИРКОНИЕВЫЕ КЕРАМИЧЕСКИЕ КОРОНЫ

Все белые детские коронки. Они действительно потрясающие.Естественный вид. Никакого металла.

Невероятно тонкие, но при этом необычайно прочные коронки из ЦИРКОНИЯ представляют собой удивительный вариант, ранее недоступный для детей. Коронки из ЦИРКОНИЯ позволяют выбрать не только самые естественные на вид. восстановление возможно для вашего ребенка, но также даст вам душевное спокойствие, зная, что вы выбираете самую здоровую и высококачественную альтернативу, доступную сегодня на рынке.

СТОПОРНЫЕ ПОЛОСТИ: ФТОРИД ДИАМИНА СЕРЕБРА

Представляем Advantage Arrest , первый и единственный фторид диамина серебра, доступный в США.

Фторид диамина серебра широко используется во многих странах мира на протяжении десятилетий. Фторид диамина серебра 38% Advantage Arrest изменит наш подход к кариесу. Преимущественный арест:

  • Обеспечивает немедленное облегчение гиперчувствительности дентина
  • Убивает болезнетворные организмы
  • Упрочняет размягченный дентин, делая его более устойчивым к кислотам и истиранию
  • Не окрашивает здоровый дентин или эмаль
  • Может обеспечить важную клиническую обратную связь из-за его способности окрашивать видимые или скрытые поражения

БЕЛЫЕ НАПОЛНИТЕЛИ БЕЗ БФА

В то время, когда мы признали и вышли за рамки серебряных пломб из-за содержания в них ртути, белые пломбы не лишены риска.BPA обычно используется в большинстве белых (или композитных) пломбы.

Исследования, проведенные примерно 10 лет назад, показали, что BPA можно обнаружить в слюне через 10 минут после установки пломбы. BPA имеет следы искусственного женского гормона, который не рекомендуется для детей. Особенно дети мужского пола.

Наша команда хорошо осведомлена об этой проблеме. Мы предлагаем продукты без BPA.

Dino Kids 'Dental предлагает комплексные педиатрические стоматологические услуги в дружелюбной, счастливой и безопасной обстановке.Наша стоматологическая бригада желает превзойти ваши ожидания и пожелания. заботиться о ВАШИХ детях так же, как мы заботимся о НАШИХ детях. Наша педиатрическая стоматологическая практика - это то место, куда мы хотели бы взять наших собственных детей, и это то место, куда наши дети ХОЧУ бы пойти. Мы хотим ваши дети получат такой же опыт.

Д-р Эстель Хвэйван Лиу - детский стоматолог, сертифицированный советом директоров. Дипломат ABPD. Она завершила обучение в докторантуре USC по педиатрической стоматологии и получила степень высшая награда за исследования.Доктор Лиу также закончила ординатуру в Детской больнице Лос-Анджелеса. Имеет 20-летний опыт работы в детской стоматологии.

Мы хотим сделать все возможное, чтобы заработать на вашем бизнесе, и наша миссия - улучшить уход за полостью рта и гигиену как можно большего числа детей. Позвольте нам помочь вам получить дети отлично начинают заботиться о здоровье полости рта.

Les diatomées pennales de la lagune de Fresco (Кот-д’Ивуар)

  • Эстель Северин Конан
  • Н’Гессан Мариз Ака
  • Мари Полетт Адон

Ключевые слова:Пеннатные диатомеи, лагуна Фреско, фитопланктон, Кот-д’Ивуар.

Абстрактные

Ce travail vise à faire l’étude taxonomique des diatomées pennales récoltées dans la lagune de Fresco en Côte d’Ivoire. Le manque d’information sur ce groupe d’algues, justifie la présente étude. Отправка сообщений на текущих рынках с Марса с 2007 по декабрь 2008 г. для станций. Фитопланктон, обновленный на планке 20 мкм, и оставленные шантильоны, содержат исправления в коммерческом помощнике с окончательной концентрацией 5%.Обычный микроскоп BX40 muni d’un micromètre objet, он используется для наблюдений за различными таксонами. Отождествления на самом деле являются помощником дайверов-умников разных авторов. Рассмотрение различных манипуляций, 30 таксонов, относящихся к 2 классам, 5 порядков, 8 семейств и 16 жанров, которые только идентифицируются. La communauté algale de la lagune de Fresco est dominée par les espèces marines (14 таксонов). Станции 4 и 5 представляют собой богатство флористики, лес плюс élevées, около 21 таксона для часовых станций.Циркулярный меридион, Pinnularia legumen, Navicula humerosa, Gyrosigma diminutum, Campylodiscus eximus, Surirella ovata, Surirella robusta, sont signalées pour la première fois en Кот-д’Ивуар.

Mots clés: Diatomées pennales, Lagune de Fresco, Phytoplancton, Кот-д’Ивуар.

Английский Название: Пеннатные диатомовые водоросли из лагуны Фреско (Кот-д’Ивуар)

В данной статье представлены морфологические определения перистых диатомовых водорослей из лагуны Фреско.Отсутствие информации о перистых диатомовых водорослях в лагуне Фреско оправдывает данное исследование. Исследование проводилось ежемесячно с марта 2007 г. по декабрь 2008 г. Для отбора проб было выбрано пять станций. Фитопланктон собирали с помощью планктонной сети 20 мкм, соединенной с коллектором. Образцы консервировали 5% забуференным формалином. Некоторые образцы планктона были подвергнуты кислотной промывке перед детальными морфологическими наблюдениями. Образцы фитопланктона были исследованы в лаборатории с помощью микроскопа Olympus BX40, оснащенного откалиброванным микрометром для наблюдения таксонов.Идентификация производилась со ссылкой на разных авторов. При наблюдении и идентификации выявлено 30 таксонов, относящихся к 2 классам, 5 отрядам, 8 семействам и 16 родам. В сообществе водорослей преобладали морские виды (14 таксонов). На станциях 4 и 5 зарегистрировано наибольшее количество таксонов (21 таксон). В Кот-д’Ивуаре впервые сообщается о Meridion Circus, Pinnularia legumen, Navicula humerosa, Gyrosigma diminutum, Campylodiscus eximus, Surirella ovata, Surirella robusta.

Ключевые слова: Пеннатные диатомеи, лагуна Фреско, фитопланктон, Кот-д’Ивуар.

Подача статьи к публикации подразумевает передачу авторских прав от автора (ов) издателю после принятия. Таким образом, International Formulas Group является правообладателем после публикации статьи в Международном журнале биологических и химических наук, и опубликованные статьи не должны использоваться в коммерческих целях без письменного согласия главного редактора.Они находятся под международной лицензией Creative Commons Attribution-Non Commercial-Share Alike 4.0.

Estelle Thild Biocleanse 3-в-1 Очищающая пенка

Многие потребители предпочитают более легкое средство для умывания в жаркие летние месяцы. Имея это в виду, мы переходим к многофункциональной очищающей пене от Estelle & Thild.

Estelle & Thild's Biocleanse 3-in-1 Cleansing Foam - это сертифицированная органическая воздушная очищающая пена. Говорят, что он образует смягчающую кожу пену, которая обновляет и освежает, наполняя кожу энергией. Мягко смывая макияж и загрязнения, он помогает придать коже сияющий тон и сияние.

На этикетке содержится указание пользователям смочить лицо водой и аккуратно нанести небольшое количество пены на кончики пальцев, чтобы образовалась густая пена.Средство следует осторожно массировать в течение одной минуты, избегая области вокруг глаз, затем смыть. Для достижения наилучших результатов компания рекомендует сочетать очищающее средство с многофункциональным тоником для лица.

Войдите или подпишитесь бесплатно, чтобы прочитать историю полностью.

Продукт предназначен для использования утром и вечером, чтобы создать чистый и свежий цвет лица с добавлением влаги. Этот продукт, наполненный черной бузиной, подходит для всех типов кожи и имеет статус вегана.

В этой колонке рассматривается список ингредиентов для обоснования претензий и функциональности.

Основа из пеноматериала

Эта пена представляет собой систему на водной основе, включающую сок листьев алоэ для его успокаивающего, увлажняющего и противовоспалительного действия, а также глицерин, увлажнитель. Система мягких поверхностно-активных веществ основана на кокамидопропилбетаине, а также на полиглицерил-4 капрате и глицерилкаприлате, которые придают смягчающие свойства.

Преимущества для кожи

Глюконолактон - полигидроксикислота, обладающая хелатирующей, увлажняющей и антиоксидантной активностями. Кроме того, экстракт бузины обладает кондиционирующими, освежающими, успокаивающими и тонизирующими свойствами кожи. Глюконат натрия также действует как хелатирующий агент и кондиционирует кожу, а лимонная кислота служит буфером. Продукт ароматизирован и консервирован бензоатом натрия и сорбатом калия.

Выводы

На мой взгляд, эти ингредиенты подтверждают заявления о легкой очищающей пене, которая нежна, но способна удалить макияж, и которая может привести к тонизированной и сияющей коже - даже в случае чувствительной кожи.

Состав: вода (вода), сок листьев алоэ барбаденсис *, глицерин, кокамидопропилбетаин, полиглицерил-4 капрат, глюконолактон, экстракт цветов самбука черной *, глицерилкаприлат, ароматизатор (парфюм), глюконат натрия, лимонная кислота. Ингредиент сорбента из органического земледелия.

* Сделано с использованием органических ингредиентов; 99,817% всех ингредиентов натурального происхождения и 14,678% всех ингредиентов органического земледелия; натуральная и органическая косметика, сертифицированная ECOCERT Greenlife в соответствии со стандартами ECOCERT

Источник: https: // estellethild.com / shop / ansiktsrengoring / biocleanse-3-in-1-cleansing-foam /

Эстель МакГроарти | Университет штата Мичиган

Эстель МакГроарти | Университет штата Мичиган - Academia.edu

Academia.edu больше не поддерживает Internet Explorer.

Для более быстрого и безопасного просмотра Academia.edu и всего Интернета, пожалуйста, обновите свой браузер за несколько секунд.

Документы

Биохимия, 1 января 1992 г.

Порин - это белок, образующий каналы во внешней мембране грамотрицательных бактерий.Ранее ... подробнее Порин - это белок, образующий каналы во внешней мембране грамотрицательных бактерий. В предыдущей статье (Todt et al., 1992) мы показали, что pH индуцирует переключение размера канала in vitro для поринов OmpF, OmpC и PhoE. В представленных здесь результатах His21 из OmpC и OmpF из Escherichia coli был химически модифицирован диэтилпирокарбонатом. Функциональный анализ этих модифицированных поринов при различных значениях pH показал, что этот гистидин участвует в индуцированном pH переключении размера канала.Анализ вторичной структуры поринов при различных pH с использованием инфракрасной спектроскопии с преобразованием Фурье показал, что не было глобального изменения структуры, сопровождающего изменение размера канала, вызванное pH.

PaperRank:

Читатели Упоминания по темеПросмотреть воздействие в мембранах эритроцитов человека до и через определенные промежутки времени после приема внутрь 10 гранов ацетилсалициловой кислоты, 10 гранов салицилата натрия или 50 мг индометацина мужчинами и женщинами.Анализ эритроцитов субъектов женского пола показал зависящее от времени нарушение порядка мембраны в течение восьмичасового периода после приема аспирина, в то время как клетки субъектов мужского пола показали небольшое упорядочение мембран в течение того же периода времени. Эритроциты, взятые у женщин в начале менструального цикла, показали наибольшее нарушение мембранной структуры через час после приема аспирина, но через восемь часов структура мембран вернулась к контрольной. Зависящее от времени нарушение структуры мембран клеток женщин в середине менструального цикла было двухфазным.Прием индометацина вызывал лишь незначительные изменения мембран как у мужчин, так и у женщин за исследуемый период времени. Прием салицилата натрия мужчинами или женщинами не вызывал значительных изменений порядка мембран эритроцитов. Промытые эритроциты при смешивании с салицилатом, аспирином или индометацином были либо идентичны контрольным клеткам, либо несколько более упорядочены. Это исследование предполагает, что вызванные аспирином изменения в структуре мембран могут зависеть от уровня стероидных гормонов.

PaperRank:

Читатели Упоминания по темеПросмотреть влияние

Компьютеры в биологии и медицине, 1 января 1981 г.

Представлена ​​программа FORTRAN IV, которая определяет точки перехода для данных, которые могут быть представлены... подробнее Представлена ​​программа FORTRAN IV, которая определяет точки перехода для данных, которые могут быть представлены набором пересекающихся линий регрессии. Первоначальные оценки не требуются, и нет необходимости в конкретном интервале между данными. Сплайн-функция используется для сокращения большого количества вычислительных шагов, связанных со сложными линейными моделями, в то время как итерационная процедура наименьших квадратов используется для получения окончательного решения. Примеры экспериментальных и искусственно сгенерированных данных представлены вместе с F-статистикой для различий в уклон в точке перехода.

PaperRank:

Читатели Статьи по теме УпоминанияView Impact

Biochemistry and Molecular Biology Education, 1 января 2004 г.

Мы разработали веб-модули, посвященные фундаментальным концепциям вводной биологии. доставляется через систему управления курсами LON-CAPA. Эти модули были разработаны и использовались в качестве дополнения к большим вводным урокам биологии, основанным на лекциях. С учетом образовательных принципов и преимуществ сетевых обучающих технологий был сделан выбор в отношении представления, представления и построения знаний (W.А. Нельсон, Д. Б. Палумбо (1992) J. Educ. Медиа Гипермедиа 1, 287–299). Презентация знаний сосредоточена на больших и соединяющих идеях. Представление знаний дало студентам возможность взаимодействовать с концепциями несколькими способами, используя несколько представлений. Для создания знаний мы способствовали активному и содержательному взаимодействию учащихся с содержанием, используя переплетенные вопросы высокого уровня. Расширенные ответы студентов на анкету показали, что эти модули существенно повлияли на обучение студентов.(Чтобы получить доступ к демонстрационным модулям, перейдите по адресу demo.lon-capa.org/cgi-bin/signon.pl?hhmi.)

PaperRank:

Читатели Упоминания по теме Просмотр воздействия

Биохимия, 1 января 1990 г.

Escherichia coli K-12 штамм RAM122 содержит мутацию в гене ompC, которая приводит к образованию восьми ... еще Escherichia coli K-12 Штамм RAM122 содержит мутацию в гене ompC, которая приводит к делеции восьми аминокислот, дельта 103-110, в пориновом белке . Поскольку этот штамм способен расти на мальтодекстринах в отсутствие функционального гена lamB, считается, что мутантный белок имеет канал большего размера.Стабильность и свойства структуры / функции мутантного порина OmpC исследовали и сравнивали с порином дикого типа. Изолированный ненагретый порин RAM122 охарактеризован как тример на гелях додецилсульфат-полиакриламид натрия. Тример RAM122 был менее устойчив к температуре по сравнению с порином дикого типа. Кроме того, общая энтальпия термической денатурации для мутанта была ниже, чем для порина дикого типа, как было определено с помощью дифференциальной сканирующей микрокалориметрии. Оба белка & amp; # 39; вторичные структуры, отслеживаемые с помощью кругового дихроизма, имели высокое содержание бета-слоев, но спектры немного отличались как в точках пересечения, так и в минимумах.Когда белки были восстановлены и активность каналов была проанализирована с использованием метода набухания липосом, предел исключения размера мутантного порина был вдвое выше, чем у порина дикого типа. Измерения проводимости через двухслойные липидные мембраны показали, что мутантный порин управлялся по напряжению при гораздо более низких мембранных потенциалах, 50 и 75 мВ, чем образец дикого типа. Завершающие события мутантного порина были преимущественно мономерного размера. Каналы, обнаруженные с использованием мутантного белка, были больше по размеру, чем каналы, измеренные для мономера порина дикого типа.Эти данные предполагают, что мутантный порин OmpC имеет размер канала, позволяющий проникать мальтодекстринам, и что этот канал сильно регулируется напряжением.

PaperRank:

Читатели Упоминания в связанных статьяхView Impact

Биохимия, 1 января 1989 г.

PaperRank:

Читатели Упоминания в связанных статьях View Impact

Биохимия, 1 января 1983 г.

Электронно-спиновый резонанс исследует 5-доксилстеарат и 4- (додецилдиметиламмоний) -oxy-2,2,6,6-t ... подробнее Для характеристики бромида 4- (додецилдиметиламмонио) -1-окси-2,2,6,6-тетраметилпиперидина использовались зонды электронного парамагнитного резонанса. текучесть участков ацильной цепи и головной группы, соответственно, определенных солей липополисахарида (ЛПС) из Escherichia coli K12.Удаление слабо связанных двухвалентных катионов из природного LPS электродиализом и их замена натрием мало влияли на среднюю точку липид-фазового перехода или на подвижность головной группы. Напротив, подвижность ацильной цепи липополисахарида увеличивалась после электродиализа. Замена большинства оставшихся катионов натрием привела к дальнейшему резкому увеличению подвижности как в полярных, так и в неполярных областях липополисахарида. Показано, что подвижность головной группы натриевой соли ЛПС снижается при добавлении двухвалентных катионов.Кроме того, представлены данные, свидетельствующие о том, что низкие концентрации магния могут вызывать разделение фаз в натриевой соли. Магниевая соль липополисахарида очень напоминала нативную форму как по подвижности головной группы, так и по подвижности ацильной цепи, хотя отношение заряда катиона к фосфору в соли магния было больше, чем обнаруженное в нативном изоляте. Анализы других солей липополисахаридов подтверждают нашу гипотезу о том, что многие наблюдаемые различия в физических и патологических свойствах солей липополисахаридов можно просто объяснить степенью нейтрализации заряда.

PaperRank:

Читатели Связанные статьи УпоминанияView Impact

Biochimica Et Biophysica Acta-biomembranes, 1 января 1986 г.

Открытие и закрытие порина ompF из Escherichia coli JF 701 было исследовано реконструкцией ... подробнее Открытие и закрытие ompF порин из Escherichia coli JF 701 исследовали путем воссоздания очищенного белка в плоских двухслойных мембранах. Изменения электропроводности мембран при постоянном потенциале использовали для анализа размера и агрегатной природы комплексов пориновых каналов и относительного числа открытий и закрытий.Мы обнаружили, что при измерении при pH 5,5 проводимость канала уменьшалась, а количество событий закрытия увеличивалось, когда напряжение превышало 100 мВ. Результаты показывают, что количество каналов проводимости превышает этот потенциал. Также наблюдалось увеличение меньших субъединиц и событий закрытия, когда pH был снижен до 3,5, и эти изменения были дополнительно усилены увеличением напряжения. Мы предполагаем, что как понижение pH, так и повышение потенциала через мембрану стабилизируют порин в конформации n, при которой субъединицы менее тесно связаны, а субъединицы открываются некооперативным образом.Эти же условия, по-видимому, также стабилизируют закрытое состояние поры.

PaperRank:

Читатели Связанные статьи УпоминанияView Impact

Биохимия, 1 января 1992 г.

Порин представляет собой тримерный белок, образующий канал во внешней мембране грамотрицательных бактерий. Функц ... подробнее Порин - это тримерный белок, образующий канал во внешней мембране грамотрицательных бактерий. Функции поринов OmpF, OmpC и PhoE из Escherichia coli K12 анализировали при различных значениях pH. Предварительные результаты анализов двухслойной липидной мембраны и набухания липосом показали, что порин in vitro имеет по крайней мере две конфигурации с открытыми каналами: малый и большой размер.Маленькие каналы были стабилизированы при низком pH, в то время как более крупные каналы были обнаружены в основных условиях. Изменение размера произошло в очень узком диапазоне, близком к нейтральному pH, и две основные конфигурации с открытыми каналами по-разному реагировали на изменения напряжения. Присутствие двух или более pH-зависимых подсостояний порина может объяснять изменчивость диаметра пор, измеряемого другими, и предполагает более динамическую роль порина в клетке.

PaperRank:

Читатели Упоминания по темеПросмотреть влияние... Pseudomonas aeruginosa МИЛДРЕД РИВЕРА И ЭСТЕЛЛ Дж. МакГроарти * Департамент биохимии, М ... подробнее ... Pseudomonas aeruginosa МИЛДРЕД РИВЕРА И ЭСТЕЛЬ Дж. МакГроарти * Департамент биохимии, Университет штата Мичиган, Ист-Лансинг, Мичиган- 48824 ... Кроме того, О-полисахариды различных серотипов P. aeruginosa богаты аминосахарами (21, 32). ...

PaperRank:

Читатели Связанные статьи УпоминанияView Impact

Биохимия, 1 января 1992 г.

Порин - это белок, образующий каналы во внешней мембране грамотрицательных бактерий.Ранее ... подробнее Порин - это белок, образующий каналы во внешней мембране грамотрицательных бактерий. В предыдущей статье (Todt et al., 1992) мы показали, что pH индуцирует переключение размера канала in vitro для поринов OmpF, OmpC и PhoE. В представленных здесь результатах His21 из OmpC и OmpF из Escherichia coli был химически модифицирован диэтилпирокарбонатом. Функциональный анализ этих модифицированных поринов при различных значениях pH показал, что этот гистидин участвует в индуцированном pH переключении размера канала.Анализ вторичной структуры поринов при различных pH с использованием инфракрасной спектроскопии с преобразованием Фурье показал, что не было глобального изменения структуры, сопровождающего изменение размера канала, вызванное pH.

PaperRank:

Читатели Упоминания по темеПросмотреть воздействие в мембранах эритроцитов человека до и через определенные промежутки времени после приема внутрь 10 гранов ацетилсалициловой кислоты, 10 гранов салицилата натрия или 50 мг индометацина мужчинами и женщинами.Анализ эритроцитов субъектов женского пола показал зависящее от времени нарушение порядка мембраны в течение восьмичасового периода после приема аспирина, в то время как клетки субъектов мужского пола показали небольшое упорядочение мембран в течение того же периода времени. Эритроциты, взятые у женщин в начале менструального цикла, показали наибольшее нарушение мембранной структуры через час после приема аспирина, но через восемь часов структура мембран вернулась к контрольной. Зависящее от времени нарушение структуры мембран клеток женщин в середине менструального цикла было двухфазным.Прием индометацина вызывал лишь незначительные изменения мембран как у мужчин, так и у женщин за исследуемый период времени. Прием салицилата натрия мужчинами или женщинами не вызывал значительных изменений порядка мембран эритроцитов. Промытые эритроциты при смешивании с салицилатом, аспирином или индометацином были либо идентичны контрольным клеткам, либо несколько более упорядочены. Это исследование предполагает, что вызванные аспирином изменения в структуре мембран могут зависеть от уровня стероидных гормонов.

PaperRank:

Читатели Упоминания по темеПросмотреть влияние

Компьютеры в биологии и медицине, 1 января 1981 г.

Представлена ​​программа FORTRAN IV, которая определяет точки перехода для данных, которые могут быть представлены... подробнее Представлена ​​программа FORTRAN IV, которая определяет точки перехода для данных, которые могут быть представлены набором пересекающихся линий регрессии. Первоначальные оценки не требуются, и нет необходимости в конкретном интервале между данными. Сплайн-функция используется для сокращения большого количества вычислительных шагов, связанных со сложными линейными моделями, в то время как итерационная процедура наименьших квадратов используется для получения окончательного решения. Примеры экспериментальных и искусственно сгенерированных данных представлены вместе с F-статистикой для различий в уклон в точке перехода.

PaperRank:

Читатели Статьи по теме УпоминанияView Impact

Biochemistry and Molecular Biology Education, 1 января 2004 г.

Мы разработали веб-модули, посвященные фундаментальным концепциям вводной биологии. доставляется через систему управления курсами LON-CAPA. Эти модули были разработаны и использовались в качестве дополнения к большим вводным урокам биологии, основанным на лекциях. С учетом образовательных принципов и преимуществ сетевых обучающих технологий был сделан выбор в отношении представления, представления и построения знаний (W.А. Нельсон, Д. Б. Палумбо (1992) J. Educ. Медиа Гипермедиа 1, 287–299). Презентация знаний сосредоточена на больших и соединяющих идеях. Представление знаний дало студентам возможность взаимодействовать с концепциями несколькими способами, используя несколько представлений. Для создания знаний мы способствовали активному и содержательному взаимодействию учащихся с содержанием, используя переплетенные вопросы высокого уровня. Расширенные ответы студентов на анкету показали, что эти модули существенно повлияли на обучение студентов.(Чтобы получить доступ к демонстрационным модулям, перейдите по адресу demo.lon-capa.org/cgi-bin/signon.pl?hhmi.)

PaperRank:

Читатели Упоминания по теме Просмотр воздействия

Биохимия, 1 января 1990 г.

Escherichia coli K-12 штамм RAM122 содержит мутацию в гене ompC, которая приводит к образованию восьми ... еще Escherichia coli K-12 Штамм RAM122 содержит мутацию в гене ompC, которая приводит к делеции восьми аминокислот, дельта 103-110, в пориновом белке . Поскольку этот штамм способен расти на мальтодекстринах в отсутствие функционального гена lamB, считается, что мутантный белок имеет канал большего размера.Стабильность и свойства структуры / функции мутантного порина OmpC исследовали и сравнивали с порином дикого типа. Изолированный ненагретый порин RAM122 охарактеризован как тример на гелях додецилсульфат-полиакриламид натрия. Тример RAM122 был менее устойчив к температуре по сравнению с порином дикого типа. Кроме того, общая энтальпия термической денатурации для мутанта была ниже, чем для порина дикого типа, как было определено с помощью дифференциальной сканирующей микрокалориметрии. Оба белка & amp; # 39; вторичные структуры, отслеживаемые с помощью кругового дихроизма, имели высокое содержание бета-слоев, но спектры немного отличались как в точках пересечения, так и в минимумах.Когда белки были восстановлены и активность каналов была проанализирована с использованием метода набухания липосом, предел исключения размера мутантного порина был вдвое выше, чем у порина дикого типа. Измерения проводимости через двухслойные липидные мембраны показали, что мутантный порин управлялся по напряжению при гораздо более низких мембранных потенциалах, 50 и 75 мВ, чем образец дикого типа. Завершающие события мутантного порина были преимущественно мономерного размера. Каналы, обнаруженные с использованием мутантного белка, были больше по размеру, чем каналы, измеренные для мономера порина дикого типа.Эти данные предполагают, что мутантный порин OmpC имеет размер канала, позволяющий проникать мальтодекстринам, и что этот канал сильно регулируется напряжением.

PaperRank:

Читатели Упоминания в связанных статьяхView Impact

Биохимия, 1 января 1989 г.

PaperRank:

Читатели Упоминания в связанных статьях View Impact

Биохимия, 1 января 1983 г.

Электронно-спиновый резонанс исследует 5-доксилстеарат и 4- (додецилдиметиламмоний) -oxy-2,2,6,6-t ... подробнее Для характеристики бромида 4- (додецилдиметиламмонио) -1-окси-2,2,6,6-тетраметилпиперидина использовались зонды электронного парамагнитного резонанса. текучесть участков ацильной цепи и головной группы, соответственно, определенных солей липополисахарида (ЛПС) из Escherichia coli K12.Удаление слабо связанных двухвалентных катионов из природного LPS электродиализом и их замена натрием мало влияли на среднюю точку липид-фазового перехода или на подвижность головной группы. Напротив, подвижность ацильной цепи липополисахарида увеличивалась после электродиализа. Замена большинства оставшихся катионов натрием привела к дальнейшему резкому увеличению подвижности как в полярных, так и в неполярных областях липополисахарида. Показано, что подвижность головной группы натриевой соли ЛПС снижается при добавлении двухвалентных катионов.Кроме того, представлены данные, свидетельствующие о том, что низкие концентрации магния могут вызывать разделение фаз в натриевой соли. Магниевая соль липополисахарида очень напоминала нативную форму как по подвижности головной группы, так и по подвижности ацильной цепи, хотя отношение заряда катиона к фосфору в соли магния было больше, чем обнаруженное в нативном изоляте. Анализы других солей липополисахаридов подтверждают нашу гипотезу о том, что многие наблюдаемые различия в физических и патологических свойствах солей липополисахаридов можно просто объяснить степенью нейтрализации заряда.

PaperRank:

Читатели Связанные статьи УпоминанияView Impact

Biochimica Et Biophysica Acta-biomembranes, 1 января 1986 г.

Открытие и закрытие порина ompF из Escherichia coli JF 701 было исследовано реконструкцией ... подробнее Открытие и закрытие ompF порин из Escherichia coli JF 701 исследовали путем воссоздания очищенного белка в плоских двухслойных мембранах. Изменения электропроводности мембран при постоянном потенциале использовали для анализа размера и агрегатной природы комплексов пориновых каналов и относительного числа открытий и закрытий.Мы обнаружили, что при измерении при pH 5,5 проводимость канала уменьшалась, а количество событий закрытия увеличивалось, когда напряжение превышало 100 мВ. Результаты показывают, что количество каналов проводимости превышает этот потенциал. Также наблюдалось увеличение меньших субъединиц и событий закрытия, когда pH был снижен до 3,5, и эти изменения были дополнительно усилены увеличением напряжения. Мы предполагаем, что как понижение pH, так и повышение потенциала через мембрану стабилизируют порин в конформации n, при которой субъединицы менее тесно связаны, а субъединицы открываются некооперативным образом.Эти же условия, по-видимому, также стабилизируют закрытое состояние поры.

PaperRank:

Читатели Связанные статьи УпоминанияView Impact

Биохимия, 1 января 1992 г.

Порин представляет собой тримерный белок, образующий канал во внешней мембране грамотрицательных бактерий. Функц ... подробнее Порин - это тримерный белок, образующий канал во внешней мембране грамотрицательных бактерий. Функции поринов OmpF, OmpC и PhoE из Escherichia coli K12 анализировали при различных значениях pH. Предварительные результаты анализов двухслойной липидной мембраны и набухания липосом показали, что порин in vitro имеет по крайней мере две конфигурации с открытыми каналами: малый и большой размер.Маленькие каналы были стабилизированы при низком pH, в то время как более крупные каналы были обнаружены в основных условиях. Изменение размера произошло в очень узком диапазоне, близком к нейтральному pH, и две основные конфигурации с открытыми каналами по-разному реагировали на изменения напряжения. Присутствие двух или более pH-зависимых подсостояний порина может объяснять изменчивость диаметра пор, измеряемого другими, и предполагает более динамическую роль порина в клетке.

PaperRank:

Читатели Упоминания по темеПросмотреть влияние... Pseudomonas aeruginosa МИЛДРЕД РИВЕРА И ЭСТЕЛЛ Дж. МакГроарти * Департамент биохимии, М ... подробнее ... Pseudomonas aeruginosa МИЛДРЕД РИВЕРА И ЭСТЕЛЬ Дж. МакГроарти * Департамент биохимии, Университет штата Мичиган, Ист-Лансинг, Мичиган- 48824 ... Кроме того, О-полисахариды различных серотипов P. aeruginosa богаты аминосахарами (21, 32). ...

PaperRank:

Читатели Упоминания по темеПросмотреть влияние Войти через Facebook
Войти через Google

Зарегистрироваться через Apple

Блузка Estelle - белая

AUS Shipping

- Стандартная доставка - 2-5 рабочих дней - БЕСПЛАТНО
(более 75 австралийских долларов)
- Стандартная доставка - 2-5 рабочих дней - 5 австралийских долларов
(менее 75 австралийских долларов)

- Экспресс-доставка - 1-2 рабочих дня - 10 австралийских долларов

Доставка в США

- Стандартная доставка - 2-5 рабочих дней - БЕСПЛАТНО
(более 100 долларов США)
- Стандартная доставка - 2-5 рабочих дней - 6 долларов США *
(менее 100 долларов США)

- Экспресс доставка - 2-3 рабочих дня - БЕСПЛАТНО
(более 150 долларов США)
- Экспресс-доставка - 2-3 рабочих дня - 15 долларов США *
(менее 100 долларов США)

* Примечание. Стоимость международной доставки и указанные выше пороговые значения стоимости заказа основаны на австралийских долларах.Они конвертируются во время покупки, поэтому указанные выше значения в долларах США могут незначительно колебаться в зависимости от обменного курса при оформлении заказа.

Для получения более подробной информации обо всех других наших вариантах международной доставки, пожалуйста, посетите нашу страницу Доставка .

Доставка

Мы можем отправить товар практически по любому адресу в мире.

После того, как вы разместите заказ, он будет отправлен как можно скорее.
Все заказы, размещенные до 14:00 с понедельника по пятницу по восточноевропейскому стандартному времени, будут отправлены в тот же день.
Во время пандемии COVID-19 наше время отправления было изменено на 13:00 по восточноевропейскому стандартному времени, поскольку наши перевозчики требуют более ранней доставки.

Все заказы, размещенные вне этого времени, будут отправлены на следующий рабочий день.
В зависимости от выбранного вами варианта доставки, все приблизительные даты доставки можно найти на нашей странице доставки.

Большинство вариантов экспресс-доставки действуют на следующий рабочий день или через 2–3 рабочих дня в зависимости от вашего местоположения.
Большинство стандартных вариантов - 3-5 рабочих дней для Австралии и других стран.

Политика возврата

Мы хотим, чтобы вы абсолютно восхищались тем, что вы заказали, если нет, мы максимально упростили процесс возврата.

Вы можете вернуть большинство новых, неоткрытых, непоношенных, немытых предметов в течение 21 дня с момента доставки (во время пандемии COVID-19 этот срок был увеличен до 30 дней). Все возвраты для изменения мнения будут выдаваться в виде кредит-ноты, действительной в течение 6 месяцев.
Предметы с окончательной распродажей (со скидкой до 40 долларов и ниже) не подлежат возврату из-за изменения решения.При возврате в онлайн-режим взимается плата за обработку в размере 7 долларов США за каждую единицу оформления.
Серьги также не подлежат возврату по соображениям гигиены.

Если вам нужно вернуть товар или вы хотите получить дополнительную информацию о нашей Политике возврата, просто выполните действия, соответствующие вашей стране, на нашей странице «Возврат и обмен».

Обзор: Estelle and Thild - Estelle Thild Super BioActive Age Control Serum

1 аква Обычная старая вода
2 глицерин Один из лучших увлажняющих ингредиентов.Естественно присутствует в коже. Он притягивает воду к верхнему слою кожи, действуя как увлажнитель.
3 сквалан Масло, естественно присутствующее в коже. Действует как смягчающее средство, смягчает кожу и образует на ее поверхности защитный слой без ощущения жирности.
4 масло Butyrospermum parkii Отличный увлажняющий ингредиент, который смягчает кожу и снижает потерю воды из ее верхнего слоя.Это также может быть полезно для защиты кожи от свободных радикалов.
5 цетеариловый спирт Не высыхающий спирт. Действует как смягчающее средство. Помогает смешивать воду и масло и создает приятную текстуру продукта.
6 глицерилстеарат цитрат Помогает смешивать масло и воду, смягчая верхний слой кожи.
7 овсяный бета-глюкан Помогает притягивать воду к верхнему слою кожи, снимать воспаление и раздражение, восстанавливать барьерную функцию и способствовать заживлению ран.Это может быть полезно для уменьшения тонких линий и морщин.
8 глюконолактон Полигидроксикислота (PHA), которая помогает удалять мертвые клетки с поверхности кожи, делая кожу более гладкой. Считается более богатым, чем AHA. Он помогает притягивать воду к верхнему слою кожи и может стимулировать выработку собственной гиалуроновой кислоты в коже, что приводит к повышению уровня увлажнения. Было доказано, что он помогает от прыщей и забитых пор.Может помочь уменьшить тонкие линии и морщинки и улучшить тон кожи при длительном применении. Может помочь нейтрализовать свободные радикалы
9 гиалуронат натрия Один из лучших увлажняющих ингредиентов. Притягивает воду к верхнему слою кожи
10 экстракт листьев rubus fruticosus
11 левулиновая кислота Помогает стабилизировать рецептуру продукта
12 левулинат натрия Консервант
13 экстракт смолы коммифоры мукул Растительный экстракт может помочь нейтрализовать свободные радикалы и уменьшить воспаление кожи.
14 гематококк плювиальный экстракт Экстракт зеленых водорослей, который может содержать антиоксидант астаксантин
15 глицерилкаприлат Смягчающее средство, которое также помогает смешивать воду и масло, а также предотвращает рост бактерий в продуктах.
16 Carthamus tinctorius Смягчающее средство, которое помогает смягчить кожу и может помочь успокоить воспаление.
17 гибридное масло, Ингредиент не распознается
18 масло семян simmondsia chinensis Смягчает верхний слой кожи и помогает восстановить здоровый кожный барьер.Показано, что помогает успокоить воспаление кожи. Это стабильное масло, что означает, что оно сохраняет свои свойства даже при контакте с воздухом.
19 каприл / каприновый триглицерид Хорошая смесь жирных кислот, которая образует защитный слой на коже. Увеличивает срок хранения продуктов. Получено из кокоса и глицерина.
20 токоферол Чистая форма витамина Е.Может помочь увлажнить и защитить кожу от свободных радикалов. Часто используется для стабилизации других ингредиентов или самой формулы.
21 год ксантановая камедь Используется для создания более густой консистенции продукта.
22 мальтодекстрин Используется для стабилизации состава продукта и помогает абсорбировать масло.
23 духи Ароматическая смесь неопределенных раздражающих ингредиентов
24 глюконат натрия Помогает стабилизировать рецептуру продукта
25 бензоат натрия Консервант
26 сорбат калия Консервант

Мутации в рецепторе ауксина TIR1, повышающие сродство к белкам ауксина / индол-3-уксусной кислоты, приводят к гиперчувствительности к ауксину

  • © Американское общество биологов растений, 2013.Все права защищены.

Abstract

Фитогормон ауксин регулирует практически все аспекты развития растений. Гормон непосредственно опосредует взаимодействие между двумя членами комплекса ауксиновых корецепторов, белком F-BOX ТРАНСПОРТНОГО ИНГИБИТОРА (TIR1) / АУКСИН-СИГНАЛЬНЫЙ белок и репрессором транскрипции AUXIN / INDOLE-3-ACETIC ACID (Aux / IAA). Чтобы узнать больше о взаимодействии между этими белками, был проведен мутантный скрининг с использованием двугибридной системы дрожжей (Saccharomyces cerevisiae) арабидопсиса (Arabidopsis thaliana).Были идентифицированы две мутации tir1, которые усиливали взаимодействие с Aux / IAA. Мутации D170E и M473L увеличивают сродство между TIR1 и мотивом degron Aux / IAA и усиливают активность комплекса SCF TIR1 . Это привело к более быстрой деградации Aux / IAA и увеличению транскрипции ауксин-чувствительных генов в растении. Растения, несущие трансген pTIR1: tir1 D170E / M473L-Myc, демонстрируют различные дефекты развития во время роста растений и проявляют фенотип гиперчувствительности к ауксину.Эта работа демонстрирует, что изменения в богатом лейцином повторяющемся домене корецептора ауксина TIR1 могут изменять свойства SCF TIR1 .

Растительный гормон индол-3-уксусная кислота (ИУК) является наиболее важным природным ауксином, способным регулировать практически все аспекты развития растений (Woodward and Bartel, 2005; Möller and Weijers, 2009; Sundberg and Østergaard, 2009). ; Takahashi et al., 2009; Overvoorde et al., 2010; Vernoux et al., 2010). Передача сигналов ауксина опосредуется по крайней мере тремя семействами белков: белками F-BOX (TIR1 / AFB) СИГНАЛИЗАЦИЯ ТРАНСПОРТНЫХ ИНГИБИТОРОВ (TIR1 / AFB), репрессорами транскрипции AUXIN / INDOLE-3-ACETIC ACID (Aux / IAA) и AUXIN RESPONSE FACTOR. (ARF) факторы транскрипции.При низких уровнях ауксина транскрипционная активность белков ARF ингибируется за счет взаимодействия с белком Aux / IAA и корепрессором TOPLESS (Reed, 2001; Tiwari et al., 2001; Weijers et al., 2005; Guilfoyle and Hagen, 2007; Szemenyei et al., 2008). Ауксин способствует привлечению белка Aux / IAA к убиквитинлигазе SCF TIR1 / AFB E3, что приводит к деградации белков Aux / IAA по пути убиквитин-протеасома, что позволяет ARF-зависимой транскрипции (Ruegger et al., 1998; Gray et al., 2001; Мокайтис и Эстель, 2008).

У Arabidopsis (Arabidopsis thaliana) было идентифицировано 29 Aux / IAA, большинство из которых имеют сходную структуру белка (Reed, 2001). Домен I Aux / IAAs связывается с TOPLESS и необходим для репрессии транскрипции (Tiwari et al., 2004; Szemenyei et al., 2008). Центральная область домена II представляет собой последовательность из шести аминокислот (VGWPPV / I), называемую дегроном, которая требуется для протеолитической деградации белков Aux / IAA (Worley et al., 2000; Рамос и др., 2001; Dreher et al., 2006). Было выделено несколько доминантных или полудоминантных мутантов с усилением функции, мутировавших внутри консервативной последовательности degron (Reed, 2001). Более поздние исследования показали, что эти мутации стабилизируют пораженные Aux / IAA, что приводит к устойчивости к ауксину (Worley et al., 2000; Ramos et al., 2001). Домены III и IV опосредуют гомодимеризацию и гетеродимеризацию, в том числе с белками ARF (Mockaitis and Estelle, 2008).

TIR1 является членом небольшого семейства белков F-бокса, которое содержит пять дополнительных белков AFB, от AFB1 до AFB5 (Dharmasiri et al., 2005b). Все шесть членов функционируют как рецепторы ауксина (Dharmasiri et al., 2005a, 2005b; Greenham et al., 2011). Структура TIR1 в комплексе с ауксином, ASK1 (для Arabidopsis SKP1-LIKE1) и мотивом degron из IAA7 показала, что домен 18 Leu-богатых повторов (LRR) образует карман для связывания ауксина и связывающую поверхность для белка Aux / IAA. (Тан и др., 2007). Ауксин действует как «молекулярный клей», чтобы направлять взаимодействие между TIR1 и мотивом degron Aux / IAAs (Tan et al., 2007). Недавние исследования показали, что различные комбинации белков TIR1 / AFB и Aux / IAA образуют комплексы корецепторов с широким диапазоном аффинностей связывания ауксина, которые могут функционировать в различных процессах, регулируемых ауксином (Navarro et al., 2006; Парри и др., 2009; Видал и др., 2010; Кальдерон Вильялобос и др., 2012).

Чтобы узнать больше о взаимодействиях между ауксином, TIR1 / AFB и Aux / IAA, мы провели мутантный скрининг на основе двугибридной системы дрожжей (Saccharomyces cerevisiae) (Prigge et al., 2010; Calderón Villalobos et al. , 2012). Были идентифицированы две мутации TIR1, D170E и M473L, которые усиливают взаимодействие между TIR1 и Aux / IAA. Мы представляем данные, показывающие, что эти две мутации увеличивают сродство между TIR1 и мотивом degron Aux / IAA и дополнительно усиливают деградацию Aux / IAAs в растении.Растения, экспрессирующие мутантные гены, проявляют фенотип гиперчувствительности к ауксину.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Идентификация мутаций TIR1 с повышенным сродством к Aux / IAA

Предыдущие исследования показали, что дрожжевую двугибридную систему LexA можно использовать для изучения взаимодействия между рецепторами ауксина TIR1 / AFB и их субстратами Aux / IAA ( Prigge et al., 2010; Calderón Villalobos et al., 2012). Белки TIR1 / AFB взаимодействуют с Aux / IAA в зависимости от концентрации ауксина.Однако взаимодействие не происходит между белками TIR1 / AFB и дегрон-мутированными Aux / IAA даже в присутствии ауксина (Prigge et al., 2010; Calderón Villalobos et al., 2012).

Используя подверженную ошибкам ПЦР, случайные мутации были внесены в полноразмерный TIR1 для создания обширной библиотеки мутантов TIR1. Затем мутантную библиотеку TIR1 сливали с ДНК-связывающим доменом LexA (DBD) и вводили в штамм, экспрессирующий белок Aux / IAA-12 (IAA12), слитый с доменом активации B42 (AD).IAA12 был выбран потому, что он имеет относительно низкое сродство к TIR1, что упрощает идентификацию мутаций, усиливающих взаимодействие. Путем скрининга мутантной библиотеки мы искали мутации TIR1, которые увеличивали взаимодействие с AD-IAA12 при обработке ауксином. На скрининге выделяли двенадцать колоний дрожжей и секвенировали плазмиды tir1.

Были идентифицированы две мутации TIR1, D170E и M473L, которые увеличивают силу взаимодействия между TIR1 и IAA12 по сравнению с контрольными дрожжевыми колониями, измеренными по активности β-галактозидазы (рис.1А). Чтобы определить, было ли это поведение специфичным для IAA12, мы протестировали мутантные белки TIR1 против ряда дополнительных белков Aux / IAA. Во всех случаях мутации повышали уровень активности β-галактозидазы (рис. 1А). Более того, мутантные белки TIR1 не взаимодействовали с дегрон-мутированными мутантами IAA7 в присутствии или в отсутствие ауксина (рис. 1B). Результаты белковых блотов показывают, что мутанты TIR1 экспрессируются на уровне, аналогичном уровню дикого типа, что позволяет предположить, что усиленное взаимодействие в дрожжах может быть вызвано изменениями сродства между TIR1 и Aux / IAA (дополнительный рис.S1A). Чтобы устранить эту возможность, IAA3, помеченный глутатион-S-трансферазой (GST), был очищен от Escherichia coli, а анализ in vitro был проведен с мутантным и диким типом TIR1-Myc, синтезированным с помощью транскрипции / трансляции (TnT) пшеницы. экстракт зародышей. Для этого эксперимента мы также создали двойной мутантный белок, несущий замены D170E и M473L. Результаты показывают, что GST-IAA3 вытягивает больше мутантного белка, чем TIR1 дикого типа, как в отсутствие, так и в присутствии ауксина (рис.2А). Кроме того, эффекты каждой мутации были аддитивными, так что двойной мутантный белок имел еще более высокое сродство к IAA3. Для дополнительной проверки этого результата была создана конструкция tir1 D170E / M473L-Myc, регулируемая нативным промотором TIR1, и введена в трансгенную линию pHS: AXR3NT-GUS. Эта линия может экспрессировать домены I и II AXR3 / IAA17 (AXR3NT) при тепловом шоке и используется в качестве репортера ауксин-зависимой деградации Aux / IAA (Gray et al., 2001). После теплового шока и обработки MG132, ингибитора протеасомы 26S, получали общий белковый экстракт и инкубировали с ауксином и без него.TIR1-Myc был разрушен гранулами анти-c-Myc, и было определено количество AXR3NT-GUS в комплексе. Результаты показывают, что tir1 D170E / M473L-Myc вытягивает намного больше AXR3NT-GUS, чем контроль (дополнительный рисунок S1B). Эти эксперименты показывают, что мутации усиливают сродство между TIR1 и белками Aux / IAA. Однако эффект мутаций можно устранить с помощью антиауксинового соединения ауксинола (Hayashi et al., 2012). Ауксинол связывается с TIR1 и блокирует образование комплекса TIR1-IAA-Aux / IAA.Этот результат показывает, что GST-IAA3 не может сбрасывать дополнительный tir1 D170E / M473L-Myc в присутствии ауксинола, аналогично контролю TIR1 (фиг. 2B).

Рисунок 1.

Идентификация мутантов TIR1 с измененным связыванием с белками Aux / IAA. А. Мутации TIR1 D170E и M473L увеличивают взаимодействие между TIR1 и различными Aux / IAA при лечении ауксином. B. Мутантные белки не взаимодействуют с дегрон-мутированными белками IAA7. Мотив degron IAA7 - это VGWPPV, тогда как он мутирован в VGWSPV в iaa7-1, на VGWPSV в iaa7-2 и на VGWSSV в iaa7-3.C. Измерение активности β-галактозидазы в штаммах дрожжей с обработкой ауксином и без нее. Звездочки указывают на статистически значимые различия между мутантами и контролем дикого типа (t-критерий Стьюдента, P <0,01). Планки погрешностей есть.

Рисунок 2.

Функции TIR1 Asp-170 и Met-473 в привязке Aux / IAA. A. Анализ с понижением уровня in vitro показывает, что GST-IAA3 поглощает больше белка D170E и M473L, чем белок TIR1 дикого типа. B. Антиауксиновый состав ауксинол отменяет взаимодействие между tir1 D170E / M473L-Myc и GST-IAA3.EtOH, этанол. В. Взаимодействие между tir1D170A и tir1M473A с Aux / IAA, оцененное с помощью дрожжевого двугибридного анализа. Мутация D170A снижает взаимодействие с IAA3 и IAA7, тогда как tir1 M473A не взаимодействует даже после обработки ауксином. D. Взаимодействие между мутантами TIR1 и GST-IAA3, оцененное методом «вытягивающего» анализа. Числа указывают кратное изменение относительно контрольного образца.

Asp-170 и Met-473 необходимы для функционирования TIR1.

Структура TIR1 показывает, что Asp-170 и Met-473 находятся вне кармана, связывающего ауксин.Asp-170 расположен на вершине домена LRR, тогда как Met-473 находится в области спирали внутри гидрофобного ядра этого домена (дополнительный рисунок S2A). Интересно, что Asp-170 консервативен среди шести белков TIR1 / AFB. Кроме того, остаток, соответствующий TIR1 Asp-170 в AFB4 (Asp-250), мутирован в Asn в мутанте afb4-2 (Greenham et al., 2011). Чтобы определить влияние замены Asp на Asn на TIR1, мы создали этот мутантный белок и проверили его с помощью метода pull-down. Белок tir1 D170N имеет сниженное взаимодействие с GST-IAA3 (дополнительный рис.S2B).

Для дальнейшего изучения функции остатков Asp-170 и Met-473 были созданы и протестированы мутации tir1 D170A и M473A в двухгибридной системе. Результаты показывают, что DBD-tir1 D170A-Myc демонстрирует сниженное взаимодействие с AD-Aux / IAA в присутствии ауксина, в то время как DBD-tir1 M473A-Myc не взаимодействует с AD-Aux / IAA по сравнению с контролем (рис. 2C). ). Аналогичные результаты были получены с помощью анализа in vitro. Замена D170A снижает восстановление TIR1, в то время как белок M473A-Myc не реагирует на ауксин (рис.2D). Эти результаты показывают, что Asp-170 и Met-473 необходимы для функции TIR1.

Мутанты TIR1 усиливают взаимодействие с мотивом Degron Aux / IAA

Структурные исследования установили пространственные отношения между TIR1 и мотивом degron IAA7. Однако структуры других доменов IAA7 и их потенциальные взаимодействия с TIR1 неизвестны. Для дальнейшего изучения эффекта D170M и M473L взаимодействие между мутантами TIR1 и различными фрагментами IAA7 определяли с помощью дрожжевого двугибридного теста.Результаты показывают, что мутации увеличивают взаимодействие между TIR1 и различными фрагментами IAA7, включая DI / II, DI / II / III и DII / III / IV, предполагая, что мутации могут усиливать взаимодействие с DII IAA7 (рис. 3A. ). Чтобы рассмотреть эту возможность, был проведен двухгибридный эксперимент с дрожжами для проверки взаимодействия между мотивом degron от IAA7 и tir1 D170E M473L. Результаты показывают, что мутантный белок лучше взаимодействует с доменом II IAA7 после обработки ауксином, чем контроль (рис.3, Б и В). Аналогичные результаты наблюдались в анализах методом «pull-down». Белок tir1 D170E / M473L не взаимодействует с GST-DI или GST-DIII / IV IAA7 (дополнительный рисунок S1C). Однако мотив GST-degron вытягивает намного больше tir1 D170E / M473L-Myc, чем контроль TIR1-Myc в отсутствие и в присутствии ауксина (фиг. 3D). Это указывает на то, что мутации TIR1 усиливают взаимодействие с мотивом degron Aux / IAA и что этот эффект, по крайней мере, частично не зависит от ауксина.

Рисунок 3.

Мутации tir1 увеличивают связывание с мотивом дегрона IAA7.А. Дрожжевое двугибридное взаимодействие между одинарными и двойными мутантными белками TIR1 и фрагментами IAA7. B. Взаимодействие между tir1 D170E / M473L и IAA7 degron. С, β-галактозидазная активность в дрожжевых клетках, экспрессирующих мутанты и дегрон IAA7. Планки погрешностей есть. Звездочки обозначают статистически значимые различия между мутантами и контролем дикого типа (t-критерий Стьюдента, P <0,01). D. Анализ с понижением уровня in vitro показывает, что мотив GST-degron притягивает больше белка tir1 D170E / M473L-Myc, чем TIR1-Myc дикого типа.Мотив degron находится с 83 по 92 положения IAA7. Числа указывают кратное изменение относительно контрольного образца.

Чтобы определить, является ли эффект мутаций специфичным для IAA, были протестированы различные ауксины, включая 4-Cl-IAA, нафтилуксусную кислоту, 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту (2,4-D) и пиклорам. Результаты показывают, что каждый из этих ауксинов, за исключением пиклорама, резко увеличивал взаимодействие. Поведение пиклораммы согласуется с более ранними исследованиями, показавшими, что TIR1 не распознает пиклорам (Calderón Villalobos et al., 2012; Дополнительный рис. S1D).

Мутации TIR1 D170E и M473L усиливают деградацию Aux / IAA

Хотя ни Asp-170, ни Met-473 не находятся в домене F-бокса, возможно, что мутации влияют на взаимодействие с адаптерным белком ASK1. Мы проверили эту возможность на дрожжах. Результаты показывают, что мутанты TIR1 демонстрируют такое же взаимодействие с ASK1, что и контроль, что позволяет предположить, что мутации не влияют на формирование комплекса TIR1-ASK (дополнительный рис.S3).

Чтобы изучить влияние мутаций на деградацию Aux / IAA, мы использовали трансгенную линию pTIR1: tir1 D170E / M473L-Myc pHS: AXR3NT-GUS. Активность GUS измеряли после обработки тепловым шоком. По сравнению с контролем трансгенные проростки tir1 D170E / M473L-Myc демонстрируют более низкую активность GUS после обработки тепловым шоком в отсутствие или в присутствии ауксина, что свидетельствует о том, что трансгенные растения tir1 D170E / M473L-Myc разлагают AXR3NT быстрее, чем контроль (рис. 4, А и Б). Белковый блот показал, что трансгенные линии экспрессировали TIR1 на аналогичном уровне (рис.4С).

Рисунок 4.

Линия ProTIR1: tir1D170E / M473L-Myc демонстрирует повышенную деградацию AXR3NT. А и Б - активность GUS указанных линий после обработки тепловым шоком в течение 2 ч. Окрашивание GUS и измерение активности GUS проводили на проростках 7-дневного возраста. NAA, 1-нафталинуксусная кислота. Пруток = 1 мм. C. Растения, несущие трансген ProTIR1: tir1 D170E / M473L-Myc, экспрессируют уровни белка TIR1, аналогичные контролю.

В дополнение к этому эксперименту мы также оценили влияние мутации на деградацию Aux / IAA у дрожжей (Havens et al., 2012). Поскольку эукариоты разделяют консервативные компоненты в SCF-зависимом пути деградации, слитые белки желтый флуоресцентный белок (YFP) -Aux / IAA быстро разрушаются комплексом SCF TIR1 при обработке ауксином у дрожжей (Nishimura et al., 2009; Havens et al., др., 2012). Количество слитого белка YFP-Aux / IAA определяли с помощью проточной цитометрии и использовали для расчета скорости разложения Aux / IAA (k 5 , согласно номенклатуре Havens et al. [2012]). Aux / IAA с более быстрым ухудшением качества имеет более высокие значения k 5 , а более стабильные Aux / IAA имеют более низкие значения k 5 .Первоначально мы тестировали деградацию IAA7 и IAA28. Наши результаты показывают, что как D170E, так и M473L резко усиливают деградацию обоих белков Aux / IAA при обработке ауксином по сравнению с контролем (фиг. 5A; таблица I). Мутации, по-видимому, действуют независимо на деградацию, поскольку эффекты являются аддитивными или синергетическими в двойном мутанте. Двойной мутант D170E M473L также увеличивал скорость деградации IAA1, IAA6 и IAA17, что указывает на то, что мутации не действуют избирательно по отношению к белку Aux / IAA (дополнительный рис.S4).

Рисунок 5.

Деградация слитых белков YFP-IAA в дрожжах в присутствии белков TIR1 дикого типа и мутантных белков TIR1 после добавления ауксина. Клетки дрожжей получали с помощью покадровой проточной цитометрии. Кривые разложения нормализовали по исходной флуоресценции. а.е., единицы абсорбции; D, Asp; Д / М, Асп / Мет; M, Met; WT, дикий тип.

Таблица I. Скорости разложения (значение k 5 ) для различных IAA в присутствии белков TIR1 дикого типа (WT) и мутантных белков

k 5 Значения были рассчитаны, как описано в разделе «Материалы и методы.

Мы также исследовали деградацию двух усеченных белков IAA28, содержащих DII: t2 с центром в домене DII; и t2V, сдвинутый на N-конец, чтобы включить восходящую последовательность KR (фиг. 5B; таблица I). Оба белка быстро разлагались под действием D170E M473L, что согласуется с нашими двухгибридными анализами и анализами с понижением уровня, что указывает на то, что мутации влияют на взаимодействие с доменом DII. Наконец, мы исследовали деградацию IAA20, в которой отсутствует домен DII. Этот белок является стабильным, что подтверждает, что область DII необходима для деградации как белками дикого типа, так и мутантными белками (рис.5Б).

Мутантные трансгенные линии tir1 демонстрируют разнообразные дефекты развития и проявляют ауксин-гиперчувствительный фонотип

Чтобы изучить влияние мутаций tir1 на развитие растений, фенотипы двух трансгенных линий pTIR1 :: tir1 D170E / M473L-Myc, 6-10 и 10-10, были охарактеризованы. Уровни tir1 D170E / M473L-Myc аналогичны контролю (рис. 4С). По сравнению с контролем, растения tir1 D170E / M473L-Myc инициируют намного больше боковых корней и имеют более мелкие розеточные листья (рис.6, А – В). Кроме того, у 6-10 растений после закрепления болтами развилось меньше пазушных ветвей по сравнению с контролем (рис. 6, D и E).

Рисунок 6.

ProTIR1: tir1 D170E / M473L растения обнаруживают дефекты роста. A. Через 10 дней роста проростки ProTIR1: tir1 D170E / M473L-Myc 6-10 имеют больше боковых корней, чем у проростков дикого типа. B. Четырехдневные проростки переносили на среду с 2,4-D и без нее еще на 6 дней. Определяли количество появившихся боковых корней на мм длины первичного корня.C, ProTIR1: tir1 Растения D170E / M473L-Myc имеют меньшие розетки по сравнению с контрольной линией. Растениям 3 недели. D и E, ProTIR1: tir1 D170E / M473L 6-10 растений имеют меньше подмышечных ветвей по сравнению с контролем. WT, Дикий тип. Штанга = 1 см. Возраст растений 7 недель. Как для B, так и для E шкалы погрешностей указаны. Звездочки обозначают статистически значимые различия между контрольными растениями tir1 D170E / M473L-Myc и TIR1-Myc (t-критерий Стьюдента, P <0,05).

Чтобы охарактеризовать реакцию на ауксин в этих линиях, было определено влияние ауксина на рост корней.Шестидневные проростки переносили на свежую среду ATS (для раствора Arabidopsis) с различными концентрациями синтетического ауксина 2,4-D. Еще через 2 дня роста измеряли длину вновь выросшего первичного корня и выражали ее относительно роста на контрольных чашках. Результат показывает, что удлинение первичного корня сильно ингибируется в трансгенных проростках pTIR1: tir1 D170E / M473L-Myc при низких концентрациях 2,4-D по сравнению с контролем (фиг. 7A). Это предполагает, что tir1 D170E / M473L вызывает у растения фенотип гиперчувствительности к ауксинам.

Рис. 7.

Линии ProTIR: tir1D170E / M473L гиперчувствительны к ауксину. A: Рост корней при увеличении концентрации 2,4-D по сравнению с необработанными контролями. В. Экспрессия ауксин-чувствительных генов в растениях ProTIR1: tir1D170E / M473L-Myc. Семидневные проростки анализировали с помощью количественной ПЦР. Показанные данные взяты из трех биологических повторов. Планки погрешностей есть. Звездочки обозначают статистически значимые различия между контрольными растениями tir1 D170E / M473L-Myc и TIR1-Myc (t-критерий Стьюдента, P <0.05).

Затем мы измерили экспрессию ауксин-чувствительных генов в трансгенных линиях tir1 D170E / M473L-Myc с помощью количественной ПЦР в реальном времени. Наши результаты показывают, что экспрессия белков tir1 D170E / M473L увеличивает транскрипцию ауксин-чувствительных генов в растении. Например, трансгенные проростки tir1 D170E / M473L-Myc демонстрировали значительно повышенный уровень РНК IAA3 по сравнению с контролем TIR1 дикого типа с обработкой 2,4-D или без нее (фиг. 7B). Подобные эффекты можно наблюдать и для других генов, чувствительных к ауксину (рис.7Б).

Функции мутаций могут быть уникальными для белка TIR1

TIR1 принадлежит к небольшому семейству белков F-бокса, которое содержит пять дополнительных белков AFB, от AFB1 до AFB5 (Dharmasiri et al., 2005b). Как отмечалось ранее, Asp-170 консервативен во всех шести белках, и мутация afb4-2 влияет на этот остаток (Greenham et al., 2011). Однако мы обнаружили, что соответствующая замена Asp-Glu в AFB1 и AFB2 не увеличивает связывание с Aux / IAA (дополнительный рис.S5, B и C). В случае AFB2 мутация уменьшила взаимодействие. Либо Met, либо Leu могут быть обнаружены в других членах семейства в положениях, гомологичных TIR1 Met-473. Мутация M468L в AFB2 не влияет на взаимодействие с Aux / IAA. Таким образом, эффекты TIR1 D170E и M473L зависят от контекста TIR1.

ОБСУЖДЕНИЕ

Путь убиквитин-протеасома является одним из наиболее важных протеолитических путей у эукариот. На этом пути небольшой белок убиквитин прикрепляется к белковым субстратам, а конъюгаты убиквитин-белок распознаются и разрушаются протеасомой 26S (Fang and Weissman, 2004).Комплексы SCF являются основным классом ферментов убиквитинлигазы (Gagne et al., 2002; Petroski and Deshaies, 2005). В этом комплексе белок F-бокса играет критическую роль в определении специфичности субстрата (Petroski and Deshaies, 2005). Растительный гормон ауксин непосредственно индуцирует быструю деградацию семейства транскрипционных репрессоров Aux / IAA под действием убиквитинлигазы SCF TIR1 / AFB E3 (Gray et al., 2001; Dharmasiri et al., 2005a, 2005b; Kepinski and Leyser, 2005; Tan et al., 2007).У арабидопсиса TIR1 является членом небольшой группы белков F-бокса, которые также включают AFB1 - AFB5 и рецептор жасмоновой кислоты CORONATINE INSENSITIVE1 (COI1; Dharmasiri et al., 2005b). Белок TIR1 играет решающую роль в регулировании большинства аспектов ауксинового ответа.

В этом исследовании были выделены две мутации TIR1, D170E и M473L, которые увеличивают взаимодействие между TIR1 и белками Aux / IAA (рис. 1, A и C). Дальнейшие исследования показывают, что мутации TIR1 увеличивают сродство к мотиву degron Aux / IAA (рис.2А; Дополнительный рис. S1B). И Asp-170, и Met-473 расположены вне ауксин-связывающего кармана TIR1 и не контактируют напрямую с ауксином или мотивом degron Aux / IAA (Tan et al., 2007). Однако, когда они мутируют в Ala, они либо уменьшают взаимодействие с IAA7 для D170A, либо отменяют взаимодействие в случае M473A, указывая тем самым, что эти две позиции важны для функции TIR1 (Fig. 2, C и D).

На данный момент неясно, как две мутации влияют на связывание Aux / IAA.Возможно, что они вызывают структурные изменения в ауксин-связывающем кармане, что приводит к более эффективному контакту между TIR1 и мотивом degron. Например, два атома кислорода в карбоксильной группе Asp-170 образуют водородные связи с двумя амидными группами основной цепи (Ala-195 и Ser-196) в соседней петле. Замена D170E может усилить эти взаимодействия, в то время как D170A устранит их. Поскольку Met-473 находится в ядре домена LRR, мутация Ala, вероятно, повлияет на укладку домена.Met-473 скрыт в домене LRR и, следовательно, не может связываться с другими взаимодействующими белками. Замена Leu на Met может привести к незначительным изменениям в домене LRR, каким-то образом облегчая взаимодействие с дегроном.

Эксперименты с трансгенной линией pHS: AXR3NT-GUS показывают, что растения pTIR1: tir1 D170E / M473L-Myc разлагают AXR3 быстрее, чем дикий тип, что согласуется с наблюдением, что мутации увеличивают аффинность к Aux / IAA и дополнительно усиливают функцию комплекса SCF TIR1 в дрожжах (рис.4 и 5). Удлинение корня линии pTIR1: tir1 D170E / M473L-Myc более чувствительно к обработке ауксином в низких концентрациях; Между тем, повышенная транскрипция ауксин-чувствительных генов наблюдалась даже без обработки ауксином, указывая на то, что tir1 D170E / M473L усиливает передачу сигнала ауксина в растении (рис. 7).

Предыдущие исследования показали, что модуль TIR1-IAA-degron является мощным инструментом для изучения функции белков. Система дегрона, индуцируемая ауксином, может быть использована для обратимого контроля деградации белков-мишеней при обработке ауксином в клетках, не являющихся растениями, таких как клетки дрожжей, курицы, мыши, хомяка, обезьяны и человека (Nishimura et al., 2009; Канке и др., 2011; Holland et al., 2012). Эта система особенно полезна для исследования функций белков в специфических процессах развития (Holland et al., 2012). В нашем дрожжевом анализе белок tir1 D170E / M473L увеличивает скорость деградации YFP-Aux / IAA7 / IAA28 примерно в 15-25 раз по сравнению с TIR1 дикого типа (рис. 6). Наши результаты предполагают, что возможно модифицировать белки TIR1 / AFB из Arabidopsis или других видов растений для увеличения гибкости ауксин-индуцибельной системы дегрона.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Создание библиотеки мутантов и скрининг мутантов

Полноразмерная комплементарная ДНК (кДНК) TIR1 была мутагенизирована с помощью подверженной ошибкам ПЦР с соотношением мутаций примерно две мутации на молекулу tir1. Продукты ПЦР лигировали в вектор pGILDA и трансформировали компетентные клетки Escherichia coli для создания библиотеки из приблизительно 1,3 × 10 4 колоний. Библиотеку трансформировали в штамм дрожжей pB42AD: IAA12 (Saccharomyces cerevisiae) (EGY48), и колонии дрожжей подвергали скринингу на синтетической выпадающей среде, не содержащей урацила, His, Trp и Leu, с добавлением 10 мкМ IAA.Общее количество проверенных дрожжевых колоний составляло около 2,5 × 10 5 . Колонии дрожжей, которые росли быстрее всех, выделяли и тестировали на чашках с 5-бром-4-хлориндолил-β-d-галактопиранозидом. Плазмиды pGILDA: tir1-Myc из положительных колоний экстрагировали и секвенировали.

Материалы и условия для растений

Все мутанты Arabidopsis (Arabidopsis thaliana), использованные в этом исследовании, были получены в экотипе Columbia-0. Поверхность семян стерилизовали в течение 20 мин в 30% коммерческом отбеливателе, высевали на среду ATS с добавлением 0.8% агар и стратифицировали в течение 2–4 дней при 4 ° C. Среда ATS состоит из 1% Suc, 5 мм KNO 3 , 2,5 мм KPO 4 , 2 мм MgSO 4 , 2 мм Ca (NO 3 ) 2 , 50 мкм Fe-EDTA и 1 мл L -1 микроэлементов. Все эксперименты с проростками проводили в условиях длинного дня (16 часов света и 8 часов темноты) в камере для выращивания (80 мкмоль м -2 с -1 , 22 ° C), если не указано иное. Растения в почве выращивали в условиях длинного дня при 22 ° C.

Плазмидные конструкции и создание трансгенных линий

Конструкции pTIR1: TIR1 / tir1-Myc были получены путем введения 5'-области длиной 2 т.п.н. выше гена TIR1, смежной с кДНК TIR1 / tir1, в вектор pGWB16. Во всех случаях плазмиды вводили в растения Columbia-0, как описано (Clough and Bent, 1998).

Экстракция РНК и ПЦР с обратной транскрипцией в реальном времени

Общую РНК экстрагировали из семидневных проростков с помощью набора RNeasy Plant Mini (Qiagen), и выход РНК количественно оценивали с помощью Thermo Scientific NanoDrop 2000.Один микрограмм РНК использовали для синтеза кДНК с использованием набора для синтеза первой цепи SuperScript III (Invitrogen). Количественная обратная транскрипция-ПЦР выполнялась, как описано ранее (Greenham et al., 2011). Данные были нормализованы к эталонному PP2AA3 в соответствии с методом сравнительного порогового цикла.

Экстракция белка и анализы Pull Down

Для выполнения анализов вытягивания из растительных экстрактов ткань собирали, измельчали ​​до порошка в жидком азоте и интенсивно встряхивали в буфере для экстракции (50 мМ Трис, pH 7.5, 150 мМ NaCl, 10% глицерина, 0,1% Nonidet P-40, полный ингибитор протеазы [Roche] и 20 мкМ MG132). Клеточный дебрис удаляли центрифугированием и определяли общую концентрацию белка с помощью анализа Брэдфорда. Общий белковый экстракт (1 мг) инкубировали с 50 мкМ ИУК или без нее при 4 ° C в течение 4 часов. TIR1-Myc выделяли с помощью 20 мкл агарозных гранул анти-c-Myc (Clontech) и пять раз промывали буфером для экстракции. Образец белка элюировали буфером для образцов SDS-PAGE, нагревали в течение 8 минут при 90 ° C, охлаждали на льду в течение 2 минут и фракционировали с помощью SDS-PAGE.Белок AXR3NT-GUS был обнаружен иммуноблоттингом с анти-GUS (Invitrogen) и визуализирован с использованием системы обнаружения вестерн-блоттинга ECL Plus (Amersham).

Анализ экстрактов зародышей пшеницы, связанных с TnT, был описан ранее (Parry et al., 2009). Вкратце, GST-Aux / IAA экспрессировали в E. coli и очищали с помощью гранул глутатион-агарозы (Sigma). Белки TIR1 / tir1-Myc синтезировали в системе экстракта зародышей пшеницы, связанной с TnT (Promega). Двадцать микролитров экстракта инкубировали с более чем 10 мкг шариков GST-Aux / IAA в 200 мкл лизирующего буфера (50 мМ Трис, pH 8.0, 200 мМ NaCl, 10% глицерина, 0,1% Твин 20 и ингибиторы протеаз) в присутствии или в отсутствие ИУК при 4 ° C в течение 1 часа. Затем реакционную смесь перенесли в колонку для микро-биоспиновой хроматографии (Bio-Rad). После промывания буфером для лизиса образцы элюировали восстановленным глутатионом (Sigma) и разделяли с помощью SDS-PAGE. Белки обнаруживались антителами против c-Myc-пероксидазы (Roche) и визуализировались.

Измерение активности GUS и β-галактозидазы

Окрашивание GUS проводили на семидневных проростках.Проростки собирали в окрашивающем растворе GUS [100 мм Na 2 PO 4 , pH 7,0, 10 мм EDTA, 0,1% Triton X-100, 1,0 мм K 3 Fe (CN) 6 и 2 мМ 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-глюкуроновая кислота], пропитывали под вакуумом в течение 20 мин и окрашивали в течение ночи при 37 ° C. Проростки очищали в 70% (об. / Об.) Этаноле и визуализировали с помощью препаровального микроскопа Nikon SMZ1500. Анализы 4-метилумбеллиферил-β-d-глюкуронида проводили для количественной оценки активности GUS (Ge et al., 2010).Для измерения активности β-галактозидазы белки экстрагировали из дрожжевых клеток с использованием реагента Y-PER (Thermo), и выход определяли с помощью анализа Брэдфорда. Анализ проводили с использованием 100 мкл белкового экстракта, 200 мкл 4 мг / мл -1 о-нитрофенил-β-d-галактозида с 700 мкл Z-буфера (16,1 г Na 2 HPO 4 · 7H 2 O, 5,5 г NaH 2 PO 4 · H 2 O, 0,75 г KCl и 0,246 г MgSO 4 · 7H 2 O в 1 л воды, pH 7.0) при 37 ° С. Реакцию останавливали добавлением 400 мкл 1 м Na 2 CO 3 и измеряли оптическую плотность при 420 нм надосадочной жидкости.

Анализ ингибирования корней

Для анализа роста корней 6-дневные проростки переносили на свежую среду ATS с различными концентрациями 2,4-D на 2 дня, а длину нового первичного корня измеряли с помощью программного обеспечения ImageJ. .

Анализы деградации Aux / IAA в дрожжах

Анализы деградации дрожжей проводили, как описано (Havens et al., 2012). Вкратце, дрожжевые штаммы, коэкспрессирующие стабильно интегрированные варианты TIR1 и YFP-меченные белки IAA, получали путем переноса свежевыращенной колонии из планшетов с дрожжевой пептон-декстрозой в синтетическую полную среду. Проточную цитометрию использовали для оценки плотности клеток (в событиях мкл -1 ) и разведения клеток таким образом, чтобы культуры находились в логарифмической фазе через 16 часов и в течение всего эксперимента. Все культуры выращивали при 30 ° C при встряхивании. Были проведены измерения преауксина для определения базовой экспрессии с последующим добавлением ауксина (10 мкМ ИУК) или имитационной обработкой (95% [об. / Об.] Этанола).Измерения проводились в течение 120–150 минут после обработки ауксином с интервалами от 3 минут в начале фазы разложения YFP-IAA до 20 минут позже в фазе разложения. Контроли измеряли каждые 1 ч на протяжении всего эксперимента.

Количественный анализ скорости разложения ИУК

Количественный анализ профилей разложения ИУК, полученных в дрожжах, проводили, как описано (Havens et al., 2012). Вкратце, динамика индуцированной ауксином деградации слитых белков YFP-Aux / IAA была охарактеризована моделью дифференциального уравнения второго порядка: курсы времени разложения YFP-IAA были сгруппированы в соответствии с идентичностью белка TIR1 (дикий тип, D170E, M473L или D170E. / M473L) для создания меньших подмножеств данных.В каждой группе двум параметрам, k 3 и k 5 , приближенным к скорости экспрессии и деградации белка Aux / IAA, соответственно, было разрешено варьировать в процессе оценки, сохраняя при этом остальные параметры постоянными. Такой подход глобального подбора гарантировал, что изменчивость деградации среди уникальных пар TIR1 и YFP-Aux / IAA представлена ​​в оценочных значениях k 5 . Остаток соответствия модели вычислялся с использованием 2 - нормы разницы между измеренной и прогнозируемой моделью интенсивностью YFP при временах измерения от 0 до 150 мин.

Данные о последовательностях из этой статьи можно найти в базах данных Arabidopsis Genome Initiative или GenBank / EMBL под следующими номерами доступа: TIR1 (At3G62980), AFB1 (At4G03190), AFB2 (At3G26810), IAA3 (At1G04240), IA15A5 (At1G) , IAA7 (At3G23050), IAA19 (At3G15540), IAA20 (At2G46990), IAA28 (At5G25890), Gh4.1 (At2G14960) и Gh4.3 (At2G23170).

Дополнительные данные

Следующие материалы доступны в онлайн-версии этой статьи.

Благодарности

Мы благодарим проф.Нин Чжэн и членов групп Эстель и Немхаузер за полезные обсуждения.

Сноски

  • Автор, ответственный за распространение материалов, составляющих выводы, представленные в этой статье, в соответствии с политикой, описанной в Инструкциях для авторов (www.plantphysiol.org): Марк Эстель (mestelle {at} ucsd .edu).

  • www.plantphysiol.org/cgi/doi/10.1104/pp.113.215582

  • ↵1 Работа выполнена при поддержке Национальных институтов здравоохранения (грант №GM43644 для M.E.), Медицинский институт Говарда Хьюза (для M.E.), Фонд Гордона и Бетти Мур (для M.E.) и Фонд семьи Пола Г. Аллена (для E.K. и J.N.).

  • ↵ [OA] Статьи в открытом доступе можно просматривать в Интернете без подписки.

  • ↵ [W] Онлайн-версия этой статьи содержит данные только для Интернета.

Глоссарий

IAA
индол-3-уксусная кислота
Aux / IAA
ауксин / индол-3-уксусная кислота
LRR
Leu-связывающий повтор
DBD
домен
AD
домен активации
GST
глутатион-S-трансфераза
2,4-D
2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота
YFP
желтый флуоресцентный белок
Раствор cs
c ATS
комплементарная ДНК